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上海哈靈生物科技有限公司
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乳酸脫氫酶（LDH）釋放法細(xì)胞繁殖與毒性定量檢測試劑盒說明書
2016-6-13 閱讀(1650)
我公司 乳酸脫氫酶（LDH）釋放法細(xì)胞繁殖與毒性定量檢測試劑是一種旨在通過酶聯(lián)連續(xù)反應(yīng)系統(tǒng)檢測由于細(xì)胞損傷導(dǎo)致的細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定的乳酸脫氫酶釋放到細(xì)胞外，使四唑鹽染料碘硝基氯化四氮唑（INT）還原為紅色甲臜（farmazan），即比色法定量測定酶活性，以評價活體細(xì)胞繁殖的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。適用于各種藥物、化學(xué)、環(huán)境因子和營養(yǎng)因子處理的貼壁或懸浮生長中的動物或人體細(xì)胞。替代傳統(tǒng)的同位素[51 Cr]釋放檢測的選擇。
注意事項
- 本產(chǎn)品為100次（1個96孔板）操作
- 操作時須戴手套
- 整個操作須無菌操作
- 建議每個樣品安排3個孔，即重復(fù)3次，計算時取其平均值
- 檢測體系相應(yīng)增加，試劑用量按比例相應(yīng)增加：例如200微升檢測體系，試劑用量增加1倍
- 每孔中的培養(yǎng)液需100微升，避免使用周邊培養(yǎng)孔（常常液體蒸發(fā)而減少）
- 系統(tǒng)測試，可以加入10微升標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent G）到50微升無細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)液里，然后加入反應(yīng)液和顯色液即可
- 細(xì)胞裂解效果不佳，可以使用20微升裂解液（Reagent A）處理
- 孵育時，須避光
- 染色完成后，建議即刻檢測，zui遲不得超過1小時
- 細(xì)胞培養(yǎng)和處理時，避免使用草酸（OXALATE），草氨酸（OXAMATE）和EDTA，否則影響檢測的準(zhǔn)確性
- 血清含有乳酸脫氫酶，建議使用濃度不要超過1％
- 細(xì)胞過度生長、密度過高、離心速度過大、培養(yǎng)箱內(nèi)外溫差過大等因素會造成細(xì)胞自然釋放乳酸脫氫酶
- 酚紅會干擾檢測
- 樣品zui大酶活性對照孔或zui大OD吸光讀數(shù)與細(xì)胞裂解程度密切相關(guān)
- 如果用戶沒有孔板離心機(jī)，則移取上清液時格外小心
- 如果用戶沒有匹配的波長，可以使用波長470nm至570nm之間的任一波長替代
