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上海哈靈生物科技有限公司
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抗血清鑒定參考意見
2013-12-25 閱讀(932)
抗血清鑒定參考意見當(dāng)免疫組化染色沒有預(yù)期的結(jié)果時，應(yīng)系統(tǒng)地找到原因，而每一次只能排除一個可能的原因。
① 確認(rèn)是否忽視一些試劑添加，包括一抗、二抗、三抗及底物等。
② 確認(rèn)所有的試劑是否按正確的順序加入，是否有足夠的時間。
③ 對照抗體的標(biāo)簽確認(rèn)是否使用正確的抗體，以及所用的檢測系統(tǒng)是否和一抗匹配，這一點是非常重要的。比如，如果反是抗體兔起源，二抗一定要用抗兔的二抗來匹配；或一抗是小鼠的IgM一抗，二抗必須是兔抗小鼠的IgM二抗。
④ 抗血清鑒定參考意見檢查抗體所使用的稀釋和稀釋液。
⑤ 檢查抗體的有效期和儲存條件，尤其是標(biāo)記了酶或熒光素的抗體，現(xiàn)在大多數(shù)試劑公司的抗體均要求在4~8℃條件下保存，應(yīng)避免反復(fù)凍融，試劑保存時一定要避免與揮發(fā)性有機溶劑同放一室，以免降低抗體的效價。
⑥ 檢查標(biāo)本的儲存條件，的已知陽性的標(biāo)本來同時做陽性對照。
⑦ 檢查色原/底物溶液，zui簡單的檢測方法是將一滴標(biāo)記有酶的抗體加入到制備好的底物溶液中，如果底物發(fā)生預(yù)期的顏色變化，因素可排除基質(zhì)。需要注意的是，有些底物在制成工作液后應(yīng)在一段時間后用完，否則會失敗。
⑧ 檢查沖洗液是否反應(yīng)試劑的比賽，溶液的pH值很重要，與過氧化物酶底物溶液，比賽中不應(yīng)含有疊氮鈉。
⑨ 抗血清鑒定參考意見檢查復(fù)染劑和封片劑是否和色彩搭配使用。
