一旦生物樣品被收集采摘，它的RNA會(huì)立刻變得非常不穩(wěn)定，極易被降解。由于特異及非特異的RNA降解，或者由于應(yīng)激反應(yīng)產(chǎn)生新的RNA都會(huì)引起RNA狀態(tài)的改變。對(duì)于生物芯片、基因表達(dá)矩陣分析（Array Analysis）、定量RT-PCR等實(shí)驗(yàn)來(lái)說(shuō)，采樣后立即穩(wěn)定樣品里的RNA以保存當(dāng)時(shí)RNA的表達(dá)狀態(tài)，是/定量研究基因表達(dá)分析的重要前提。為了達(dá)到這個(gè)目的，往往需要將液氮或者干冰帶到采樣現(xiàn)場(chǎng)，采樣后立即運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室保存。對(duì)于實(shí)驗(yàn)者來(lái)說(shuō)，無(wú)論是采樣還是將樣品取出以抽提RNA都非常不方便。QIAGEN公司推出的RNeasy Protect Kits提供一種RNAlater RNA Stabilization Reagent，只要在采樣后立即加入這種試劑，即可保護(hù)樣品中的RNA完整而不被降解。在RNAlater中的樣品RNA可以在37度下穩(wěn)定保存1天，或者在18—25度保存7天，2—8度穩(wěn)定4周，或者在-20度*保存。這種技術(shù)為在不同溫度下采樣，運(yùn)輸和保存樣品提供了極大的方便，特別適用于各種動(dòng)物組織、培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、白細(xì)胞，但必須說(shuō)明的是它不適用于全血或體液中RNA的保存。
RNAlater的用法非常簡(jiǎn)單，只要在采樣后立即將樣品*浸入適量（10ul/1mg組織）的RNAlater中即可。取樣的動(dòng)作要盡量快速利索，組織樣品的大小以不超過(guò)0.5公分厚為宜，對(duì)于一些小的組織如小鼠的脾、腎等器官則可以整個(gè)取出浸入溶液中，較大的則應(yīng)切開(kāi)為厚度小于0.5公分的小塊，以確保RNAlater能迅速擴(kuò)散滲透入組織塊中的所有細(xì)胞中。采樣的容器應(yīng)該足夠大以容納10倍于組織重量的溶液，避免組織塊擠在一起，同時(shí)建議將溶液加滿(mǎn)容器以避免在運(yùn)輸過(guò)程中組織塊露出液面。注意本試劑只適用于新鮮樣品，對(duì)于冷藏和包埋的樣品請(qǐng)選用RNeasy Kit。
保存后的樣品可以直接用于RNA或者mRNA的抽提。RNAlater不會(huì)影響組織塊的結(jié)構(gòu)，可以在室溫下切出適量的組織塊用于稱(chēng)量和抽提RNA，剩下的部分可用于繼續(xù)保存樣品。-20度凍存的樣品可以取出在室溫下進(jìn)行稱(chēng)量等操作而無(wú)需干冰。在-20度凍存的樣品反復(fù)凍融20次RNA依然保持完好無(wú)損。RNAlater處理的樣品比新鮮組織稍微硬一點(diǎn)，但對(duì)不會(huì)影響勻漿過(guò)程。取出適量的樣品即可開(kāi)始加RLT緩沖液進(jìn)行勻漿化。和傳統(tǒng)的RNeasy Kit一樣，RNeasy Protect Kits采用硅膠膜純化柱技術(shù)，迅速特異地吸附樣品裂解液中的RNA，經(jīng)過(guò)洗滌除去各種雜質(zhì)，不用酚氯仿抽提，不用乙醇沉淀或LiCl沉淀，也不用CsCl超離，只要洗脫即可得到純的RNA，樣品量根據(jù)樣品量、所選的試劑盒型號(hào)可達(dá)100微克，或者1毫克，甚至6毫克。
通常情況下RNeasy的純化技術(shù)足以除去絕大部分的DNA，而無(wú)需額外進(jìn)行DNaes處理，但是對(duì)于一些對(duì)痕量DNA非常敏感的實(shí)驗(yàn)，用RNase-Free DNase Set（QIAGEN cat.no.79254）可以直接在純化柱上消化DNA殘留，在隨后的洗滌步驟中除去DNase，zui后洗脫得到不含DNA的純RNA。
- Immediate RNA stabilization and protection in biological samples to ensure reliable gene-expression and gene-profiling data
- Convenient and safe handling with innovative RNAlater™ stabilization at room temperature — no need for liquid nitrogen or dry ice
- Archived biological samples can go through multiple freeze–thaw cycles without risk of RNA degradation
- Easy, fast, and reliable RNA isolation — ready-to-use RNA for all downstream applications
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