有些實驗室設(shè)備可以說是無處不在，看看周圍，基本上每個實驗室都擁有移液槍和離心機(jī)，當(dāng)然還有酶標(biāo)儀。從化學(xué)、藥物研發(fā)到蛋白質(zhì)組學(xué)，酶標(biāo)儀是許多實驗室*的中高通量檢測設(shè)備，可以進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附ELISA、NADH定量、蛋白相互作用分析和酒類檢測等等。
酶標(biāo)儀實際上是一種能夠放入微孔板并進(jìn)行讀取的微孔板檢測儀。市面上，酶標(biāo)儀有多種讀取模塊可選，包括zui經(jīng)典的吸收光、熒光和發(fā)光檢測三模塊，還有一些特殊的功能模塊，例如時間分辨熒光、熒光偏振、熒光共振能量轉(zhuǎn)移FRET、和濁度測定等等。濁度測定是通常用于溶解度和濁度分析的光散射檢測法。
zui常用的酶標(biāo)儀檢測模塊是吸收光、熒光和發(fā)光檢測。我們既可以選擇只具有某一種功能的單模塊酶標(biāo)儀，也可以選擇兼具不同功能的多模塊酶標(biāo)儀。市面上大多數(shù)廠商所提供的酶標(biāo)儀，類型多檢測范圍廣，不過也有一些公司專攻特殊領(lǐng)域，例如Biochrom公司和Bio-Rad Laboratories就專注于吸收光檢測。酶標(biāo)儀的應(yīng)用
下手任何商品之前我們都會首先考慮到它的應(yīng)用，在選擇酶標(biāo)儀時我們自然也會先想想要用它來做什么。如果我們只是做個ELISA在溶液中定量特定蛋白，那么可以選擇能在可見光范圍內(nèi)檢測吸光度的酶標(biāo)儀。對于Bradford法等蛋白定量實驗來說，也同樣如此。不過，如果我們既需要定量核酸又要定量蛋白，那么就應(yīng)該選擇能夠讀取紫外光的酶標(biāo)儀。從根本上來說，一個吸收光模式的酶標(biāo)儀，就是一個可以讀取微孔板的分光光度計。
如果我們需要構(gòu)建熒光素酶報告系統(tǒng)，用其轉(zhuǎn)染細(xì)胞并定量其表達(dá)，那么就需要能夠進(jìn)行發(fā)光檢測的酶標(biāo)儀。若要用酶標(biāo)儀進(jìn)行熒光檢測，那么就得先確定是只需熒光強(qiáng)度檢測，還是需要時間分辨熒光等其他應(yīng)用。（時間分辨熒光技術(shù)中，背景信號在檢測前衰減，以此增強(qiáng)信噪比。）有些酶標(biāo)儀可以支持特定的第三方應(yīng)用，例如CisBio公司的均相時間分辨熒光HTRF實驗，PerkinElmer公司的AlphaScreen® 和AlphaLISA® 實驗等。
若是你對細(xì)胞學(xué)實驗感興趣，那么就應(yīng)當(dāng)選擇可以從微孔板底部讀數(shù)的酶標(biāo)儀，因為細(xì)胞一般都長在微孔底部，從底部讀取可以增加檢測的靈敏度和信噪比。目前，用成像技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞學(xué)研究已經(jīng)成為一股潮流，不過這樣的技術(shù)成本高檢測速度也比較慢，而酶標(biāo)儀快速讀取分析的能力使其更能滿足日益增長的通量需求。
有時可能我們并不確定未來的應(yīng)用方向，或者很可能會用到多種檢測模式（例如需進(jìn)行多個項目的大型實驗室），這時就可以考慮多模塊酶標(biāo)儀。相對于單模塊而言，多模塊酶標(biāo)儀雖然價格較高但其靈活性也更強(qiáng)。
配套微孔板
絕大多數(shù)酶標(biāo)儀可以兼容96孔和384孔微孔板，若要使用更高密度的微孔板，就需要相應(yīng)的模塊。專為高通量篩選設(shè)計的微孔板一般有1536孔，超高密度能達(dá)到3456孔，但支持這種超高密度微孔板的酶標(biāo)儀比較少。同樣，有些酶標(biāo)儀也不能支持低密度微孔板，例如細(xì)胞培養(yǎng)實驗中的6孔或24孔板。
速度和通量
如果實驗室每天都要進(jìn)行大量的樣本分析，檢測幾十塊微孔板，那么就需要考慮到每塊板的檢測時間，如果時間過長就可能對后檢測的樣品造成影響。有些酶標(biāo)儀只有一個通道，有些酶標(biāo)儀具有八個通道。即使是單通道酶標(biāo)儀，不同系統(tǒng)的讀取速率也不盡相同，讀取96孔板可能需要25s或15s。八通道酶標(biāo)儀讀取速度要快得多，單個波長下讀取整塊96孔板僅需4s。
若是微孔板檢測的量很大，我們還可以選擇帶有plate stacker的酶標(biāo)儀，或者考慮將酶標(biāo)儀整合到自動化工作流程中。假如待測樣品中的信號會很快衰退需盡快讀取，那么選擇整合有液體處理系統(tǒng)的酶標(biāo)儀，或者給酶標(biāo)儀配上自動注射裝置。
給定檢測模塊可用的檢測器數(shù)量，也同樣會影響酶標(biāo)儀檢測的速度。配備多個檢測器可以同時讀取多個孔，也可以同時讀取一個孔中的多種信號。配備多個光電倍增管的熒光檢測系統(tǒng)能夠使檢測速度顯著提高，在某些情況下能將檢測時間減少一半。
光學(xué)系統(tǒng)
購買酶標(biāo)儀時，選擇合適的光學(xué)系統(tǒng)很重要。絕大多數(shù)酶標(biāo)儀要么是濾光片型，要么是單色器型（包括光柵和棱鏡）。一般來說，濾光片比單色器更靈敏，但一個濾光片只能檢測一個特定波長，這限制了濾光片系統(tǒng)的靈活性。單色器系統(tǒng)一般通過光柵選擇特定波長，其靈活性就比濾光片要大，不過其檢測速度稍慢。單色器系統(tǒng)能夠進(jìn)行光譜掃描，而濾光片系統(tǒng)就無法實現(xiàn)。
有些廠家將濾光片的靈敏性與單色器的波長選擇能力結(jié)合起來，例如Molecular Devices公司為其SpectraMax Paradigm平臺推出的TUNE波長可調(diào)節(jié)檢測卡盒（TUNE detection cartridge）。還有BioTek公司的Hybrid Technology系統(tǒng)，該系統(tǒng)將濾光片和單色器組合起來，想用濾光片時選濾光片，想用光柵時選光柵。此外，BMG LABTECH公司的分光光度計利用棱鏡分光并投射到CCD裝置上，能夠同時實現(xiàn)200到1000 nm波長范圍內(nèi)的檢測。
升級能力
實際上真正把升級能力利用起來的用戶并不多，換句話說大多數(shù)用戶從來不曾真去升級，不過它的確能使你的系統(tǒng)不那么容易過時，也能為日后拓展應(yīng)用省下一筆開支。如果目前我們的資金無法一次配齊全套檢測模塊，那么可以先支出較少的入門費(fèi)用，等日后再逐步升級。
其他因素
根據(jù)實驗的不同需要，我們在購買酶標(biāo)儀之前，可能還需要考慮到溫度控制、氣體控制（為細(xì)胞實驗控制氧氣/二氧化碳條件）、振搖、一體化液體處理系統(tǒng)（能在讀數(shù)前添加試劑）等等。此外，有時還要考慮到廠家所能提供的各項認(rèn)證，例如IQ、OQ和PQ；21 CFR 11；GLP和GMP等。
如果我們所要檢測的樣品量很小，就需要采用微量的檢測裝置，例如Tecan公司的NanoQuant Plate，Thermo公司的μDrop Plate，BioTek公司的Take3超微量檢測板等等，上述裝置可以同時對16個2μL樣品進(jìn)行DNA 或RNA定量。
軟件的數(shù)據(jù)分析和用戶界面也是需要考慮的因素。對此我們可以提出以下問題：軟件是否直觀簡便？是否支持多個使用者？是否簡化了校準(zhǔn)等維護(hù)程序？是否需要軟件許可證？
zui后專家提醒我們，在選擇酶標(biāo)儀時，應(yīng)當(dāng)將其視為工作流程的一部分。酶標(biāo)儀的檢測很快，但還是需要一些人工操作的，尤其是對于96孔板或384孔板檢測。如果檢測量很大，就有必要購入洗板機(jī)。一切的一切，都是為了提高檢測的信噪比，獲得的實驗結(jié)果。
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