人膠原酶Ⅲ(Collagenase Ⅲ)ELISA試劑盒待檢樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清液,血清, 血漿,尿液,組織液,心房水,體液標(biāo)本等等,如果您準(zhǔn)備代檢測(cè),
請(qǐng)寄標(biāo)本時(shí)需注明以下情況:
1、標(biāo)本編號(hào);
2、所測(cè)項(xiàng)目;
3、是否做復(fù)孔;
4、;
5、實(shí)驗(yàn)后標(biāo)本是否寄回。
人膠原酶Ⅲ(Collagenase Ⅲ)ELISA試劑盒檢測(cè)原理:
采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。
保存:2-8℃
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5.裂解細(xì)胞:用*消化后,離心收集細(xì)胞,每瓶細(xì)胞用100μl細(xì)胞裂解液,用吸管吹打數(shù)下,使細(xì)胞和裂解液充分接觸,冰浴5min,12000 r/min于4℃離心30min,取上清,用于以下實(shí)驗(yàn)。
6. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人膠原酶Ⅲ(Collagenase Ⅲ)ELISA試劑盒操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔,空白孔什么都不加;標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 待測(cè)樣本孔各加待測(cè)樣本50μL;
4. 隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中(空白孔不加)加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 所有孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 所有孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
結(jié)果判斷
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。
馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂培養(yǎng)基(含*) GB
Potato Dextrose Agar with Chloramphenicol
——用于霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)
馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂培養(yǎng)基(不含*) GB
Potato Dextrose Agar Medium(PDA)
——用于霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)
馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA) USP/EP
Potato dextrose agar
——用于霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)
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