CHNO氧化酶XOD測(cè)試盒_氧化與抗氧化_分光法
測(cè)定方法：分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣
注 意：正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義：
XOD（EC 1.17.3.2）催化CHNO氧化生成尿酸和超氧陰離子，是活性氧主要來源之一；同時(shí)也是核苷酸代謝的關(guān)鍵酶之一。XOD主要分布于哺乳動(dòng)物的心，肺，肝臟等組織中，當(dāng)肝功能受損時(shí)，XOD大量釋放到血清中，對(duì)肝損害的診斷具有特異性的意義。
測(cè)定原理：
XOD催化CHNO產(chǎn)生尿酸，尿酸在290nm下有特征吸收峰。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
CHNO氧化酶XOD測(cè)試盒_氧化與抗氧化_分光法
試劑組成和配制：
提取液：60mL×1瓶，4℃保存；
試劑一：60mL×1瓶，4℃保存；
試劑二：粉劑×4瓶，4℃保存。
粗酶液提取：
1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備：
細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
2、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。
操作步驟：
1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至290nm，蒸餾水調(diào)零。
2、XOD檢測(cè)工作液的配制：用時(shí)在每瓶試劑二中加入15mL試劑一，充分混勻，現(xiàn)配現(xiàn)用；
3、測(cè)定前將XOD檢測(cè)工作液37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃（其它物種）水浴10min。
4、取1mLXOD檢測(cè)工作液于1mL石英比色皿中，再加入35μL樣本，混勻，室溫下立即測(cè)定290nm下的初始吸光值A(chǔ)1和1min后的吸光值A(chǔ)2，計(jì)算ΔA＝A2-A1。
