豬血管生成素2ANG2ELISA試劑盒氧化與抗氧化

測定方法：分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格：50管/24樣

注    意：正式測定前取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義：

GOD（EC 1.1.3.4）廣泛存在于動物、和植物中，催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸，并產(chǎn)生H2O2，是生物體中產(chǎn)生活性氧的代謝途徑之一。

豬血管生成素2ANG2ELISA試劑盒氧化與抗氧化

測定原理：

GOD催化產(chǎn)生H2O2，過氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基偶聯(lián)酚，生成有色化合物，在500 nm有特征吸收峰，顏色深淺與GOD活性成線性關系。

試驗中所需的儀器和設備：

可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水

試劑的組成和配制：

提取液：液體60mL×1瓶，4℃保存；

緩沖液：液體50mL×1瓶，4℃保存；

試劑一：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入20mL緩沖液充分溶解待用；用不完的試劑4℃保存一個月；

試劑二：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入20mL緩沖液充分溶解待用；用不完的試劑4℃保存一個月；

樣品測定的準備：

1、細菌、細胞或組織樣品的制備：

細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、血清（漿）樣品：直接檢測。

測定步驟：

1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至500nm，蒸餾水調(diào)零。

2、試劑一和試劑二的配制：參見試劑的組成和配制。

3、煮沸樣本的準備：取500μL樣本至新的EP管中，95℃水浴10min，冷卻至室溫后，8000g 4℃離心10min，取上清作為對照管的煮沸樣本待測。

4、測定操作表