HepG2.2.15細(xì)胞培養(yǎng)方法：收到HepG2.2.15細(xì)胞后,在倒置顯微鏡下觀察整個(gè)細(xì)胞生長情況:如果細(xì)胞未長滿,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴(yán)格無菌操作。
細(xì)胞周期的DNA檢測 ：Ⅰ、樣品準(zhǔn)備 準(zhǔn)備以下一種或幾種樣品
A、組織單細(xì)胞懸浮液(如淋巴腺、脾、骨髓、胎盤細(xì)胞)
B、組織培養(yǎng)細(xì)胞
C、Ficoll-hypaque分離的單核細(xì)胞
?、颉⒎磻?yīng)體系-DNA低滲緩沖液
檸檬酸三鈉 0.25g
Triton-X 100 0.75ml
Propidium iodide 0.025g
核糖核酸酶 0.005g
蒸餾水 250ml
我們將該DNA低滲溶液于密閉瓶子中存放數(shù)月后并無發(fā)現(xiàn)有任何染色活性的丟失
Ⅲ、染色
1、 每一個(gè)管子中放入1×106個(gè)細(xì)胞;
2、 樣品離心后盡可能*地移去上清液，并且不要打碎沉淀塊;
3、 入1ml的DNA低滲染色(可用甲基綠進(jìn)行染色)緩沖液至沉淀中，并混勻;
4、 樣品于4℃下避光30分鐘或zui長不超過1個(gè)小時(shí)以備流式細(xì)胞儀分析 。
注意：延長在低滲緩沖液的曝光時(shí)間會(huì)引起樣品碎片的增加。
用途： 本產(chǎn)品只提供給進(jìn)一步的科研使用，不可應(yīng)用于治療等其他方面。
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說明，拜力生物細(xì)胞專家細(xì)胞網(wǎng)主營：ATCC細(xì)胞,sciencell細(xì)胞,CellResearchCorp細(xì)胞等。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含：1)50ml*培養(yǎng)基(包含生長因子和血清);2)說明書及注意事項(xiàng);3)公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)一代凍存。每管含有細(xì)胞數(shù)>5×10^5cells/ml，此細(xì)胞通過對Cytokeratin-18, -19 和Vimentin的免疫熒光染色驗(yàn)證，經(jīng)測試不含有支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。細(xì)胞可以達(dá)到15倍增。客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。
其它信息，拜力生物常售細(xì)胞種類如下：
L1210 淋巴白血病 AtT20 垂體瘤 P388D1 淋巴樣瘤 NS-1 骨髓瘤 SRS-82 腹水瘤 SP2/0 骨髓瘤 SAC-IIB2 腹水瘤 P3-NS-1/1-Ag4.1 骨髓瘤 SAC-IIC3 腹水瘤 45.6.TG1.7 骨髓瘤 S180 腹水瘤 P3-X63-Ag8 骨髓瘤 B16 黑色素瘤 J774A.1 單核細(xì)胞-巨噬細(xì)胞 C127 乳腺腫瘤 RAW264.7 單核細(xì)胞-巨噬細(xì)胞 F9 胚胎瘤 NG108-15 小鼠神經(jīng)細(xì)胞瘤×大鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞雜交細(xì)胞 2.大鼠類 C6 膠質(zhì)瘤 RH-35 肝癌 SHZ-88 乳腺癌 CBRH-7919 肝癌 PC-12 腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤 3.人類 *A431 表皮癌 QGY-7701 肝癌 A673 橫紋肌癌 QGY-7703 肝癌 Tca-8113 舌鱗癌 SMMC-7721 肝癌 Acc-2 涎腺腺樣囊性癌 786-O 腎透明細(xì)胞腺癌 Acc-3 涎腺腺樣囊性癌 PC-3 前列腺癌 KB 口腔表皮樣癌 T-24 膀胱變移細(xì)胞癌 HEp-2 喉表皮樣癌 SCaBER 膀胱鱗癌 CNE 鼻咽癌 Ho-8910 卵巢癌 TT 髓性甲狀腺癌 L1 卵巢癌 Bcap-37 乳腺癌 HeLa 宮頸癌 ZR-75-30 乳腺癌 HeLa229 宮頸癌 MCF-7 乳腺腺癌 KB-C1.5 宮頸癌 SK-BR-3 乳腺腺癌 HCC 子宮高分化鱗癌 MDA-MB-435S 乳腺管癌 JAR 胎盤絨毛癌 T47D 乳腺管癌 RD 惡性胚胎橫紋肌瘤 HBL-100 乳腺細(xì)胞 BT-325 神經(jīng)膠質(zhì)瘤 SMC-1 惡性胸膜間皮瘤 SK-N-SH 神經(jīng)母細(xì)胞瘤 A549 肺癌 U251 星形膠質(zhì)瘤 A2 肺癌 SHG-44 膠質(zhì)瘤 95-D 高轉(zhuǎn)移肺癌 A375 惡性黑色素瘤 Calu-3 肺腺癌 (胸膜滲出液) Bowes Melanoma 黑色素瘤 LTEP-a-2 肺腺癌 MM96L 黑色素瘤 NCI-H460 大細(xì)胞肺癌 6T-CEM T細(xì)胞白血病 SH-77 小細(xì)胞肺癌 J-111 單核細(xì)胞白血病 NCI-H446 小細(xì)胞肺癌 Dami 巨核細(xì)胞 SPC-A-1 肺腺癌 CHMas 肥大細(xì)胞白血病 SGC-7901 胃腺癌 HEL 紅細(xì)胞白血病 (Erythroleukemia) BGC-823 低分化胃腺癌 HL-60 原髓細(xì)胞白血病等等。
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