細(xì)胞名稱:CNE-2Z人鼻咽癌母系細(xì)胞
CNE-2Z人鼻咽癌母系細(xì)胞
傳代方法:
收到細(xì)胞后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài):如果沒長滿,將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺(tái)內(nèi)更換新鮮培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。
如果細(xì)胞已經(jīng)長滿(約80%-90%)則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。
貼壁細(xì)胞傳代方法:
1 棄去培養(yǎng)基,用不含鈣、鎂離子的PBS 洗1-2 次。
2 加1ml 0.25%的*(含0.02%EDTA),讓*與大部分細(xì)胞接觸后放入37℃培養(yǎng)箱內(nèi),隨時(shí)觀察細(xì)胞狀態(tài)變化,待細(xì)胞大部分變圓后加*培養(yǎng)基終止消化。
懸浮細(xì)胞傳代方法:
可以直接傳代也可以離心法傳代。
1.直接傳代是讓懸浮細(xì)胞慢慢沉淀在瓶底后,將上清吸掉1/2-2/3,吹打細(xì)胞形成細(xì)胞懸液后,分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。
2.離心法傳代是將細(xì)胞連同培養(yǎng)液一并轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),1000rpm,5 分鐘,去除上清,加新的培養(yǎng)液到離心管內(nèi),吹打細(xì)胞形成細(xì)胞懸液后,分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。一般沒有特殊說明,細(xì)胞一般是一傳二。
凍存方法:
90%FBS,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
儲(chǔ)存:液氮中*保存。
注:1 觀察細(xì)胞在低倍鏡下觀察,便于整體估計(jì)細(xì)胞密度。
2.在運(yùn)輸過程中可能會(huì)導(dǎo)致一些貼壁不牢的細(xì)胞發(fā)生部分脫落,可離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng)。
3.收到細(xì)胞后若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、細(xì)胞污染等,請盡快與我們。
常見問題及解決方案:
1、培養(yǎng)瓶有破裂,培養(yǎng)液有漏液:細(xì)胞*可能會(huì)污染,所以我們會(huì)及時(shí)安排幫老師解決。
2、細(xì)胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細(xì)胞生長至匯合度80%,進(jìn)行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁,將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo),直到問題解決。
我公司還可提供一下細(xì)胞株:
SK-BR-3 | 人乳腺癌細(xì)胞 | 貼壁生長 |
S180 | 小鼠腹水瘤細(xì)胞 | 半貼壁 |
C918 | 人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞 | 貼壁生長 |
H292 | 人表皮肺癌細(xì)胞 | 貼壁生長 |
HO-8910 | 人卵巢癌細(xì)胞 | 貼壁生長 |
IshiKawa | 人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞 | 貼壁生長 |
HPMEC | 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 貼壁生長 |
DF-1 | 雞胚腎細(xì)胞 | 貼壁生長 |
MDCK | 狗腎細(xì)胞 | 貼壁生長 |
PK-15 | 豬腎細(xì)胞 | 貼壁生長 |
VERO | 非洲綠猴腎細(xì)胞 | 貼壁生長 |
Marc145 | 猴胚胎腎上皮細(xì)胞 | 貼壁生長 |
Hep3B | 類上皮樣細(xì)胞 | 貼壁生長 |
HepG2 | 肝癌細(xì)胞 | 貼壁生長 |
HelaS3 | 人宮頸癌細(xì)胞 | 貼壁生長 |
INS-1 | 大鼠胰島素細(xì)胞 | 貼壁生長 |
HCT-8/V | 人結(jié)腸癌長春新堿耐藥株 | 貼壁生長 |
THP-1 | 人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞 | 半貼壁 |
Kyse510 | 人食管癌細(xì)胞 | 貼壁生長 |
MIN6 | 小鼠胰島素瘤細(xì)胞 | 貼壁生長 |
HCT116 | 人結(jié)腸癌細(xì)胞 | 貼壁生長 |
ASPC-1 | 人轉(zhuǎn)移胰腺癌細(xì)胞 | 貼壁生長 |
CFPAC-1 | 人胰腺癌細(xì)胞 | 貼壁生長 |
16HBE | 人支氣管上皮細(xì)胞 | 貼壁生長 |
LX-2 | 人肝星形細(xì)胞 | 貼壁生長 |
95C | 低轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞 | 貼壁生長 |