購買我司細(xì)胞全程指導(dǎo):
)培養(yǎng)瓶有破裂,培養(yǎng)液有漏液:細(xì)胞可能會污染,所以我們會及時安排幫老師解決。
2)細(xì)胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉,留0ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細(xì)胞生長至匯合度36%,進(jìn)行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁,將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo),直到問題解決。
血清的種類和品質(zhì)對于的生長會產(chǎn)生的影響,血清對細(xì)胞培養(yǎng)來說是一個極為重要的營養(yǎng)來源,血清使用錯誤會造成細(xì)胞無法存活。造成細(xì)胞無法存活的還有培養(yǎng)基,每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞 |
貨號 | GY-6998A |
價格 | 來電可 享受優(yōu)惠 |
客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
. 取出小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
) 吸出小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.25%消化液mL至培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml*培養(yǎng)基終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按:2-:3適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
注意事項:
. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通;由于運輸?shù)脑?,個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
5. 該細(xì)胞只可用于科研。
備注:由于實驗所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同,以上方法僅供各實驗室參考
收到常溫細(xì)胞后如何處理?
、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。
Bacillus licheniformis地衣形芽孢桿菌LAMP試劑盒
Bacillus spp.芽孢桿菌通用LAMP試劑盒
Bacillus subtilis枯草芽孢桿菌LAMP試劑盒
Bacteroides fragilis脆弱擬桿菌LAMP試劑盒
Bacteroides spp.擬桿菌屬通用LAMP試劑盒
Baculoviral Midgut Gland Necrosis Type Virus (BMNV)中腸腺壞死桿狀病毒LAMP試劑盒
Baculovirus Penaei(BP)對蝦桿狀病毒LAMP試劑盒
Balamuthia mandrillaris巴氏阿米巴原蟲LAMP試劑盒
Barmah Forest Virus(BFV) 巴馬森林病毒RT-LAMP試劑盒
Bartonella bacilliformis桿狀巴爾通體LAMP試劑盒
Bartonella elizabethae伊麗莎白巴爾通體LAMP試劑盒
Bartonella henselae漢氏巴爾通體(漢塞巴爾通體、貓抓病、貓抓熱)LAMP試劑盒
Bartonella quintana五日熱巴爾通體LAMP試劑盒
Bartonella spp.巴爾通體通用LAMP試劑盒
Bartonella vinsonii文氏巴爾通體LAMP試劑盒
Batrachochytrium dendrobatidis箭毒蛙壺菌LAMP試劑盒
Beak and Feather Disease Virus(BFDV)鸚鵡喙羽病病毒LAMP試劑盒
Bear Canyon virus(BCNV)熊峽谷病毒RT-LAMP試劑盒
Beauveria bassiana球孢白僵菌LAMP試劑盒
Bebaru Virus(BEBV)貝巴魯病毒RT-LAMP試劑盒
Besnoitia besnoiti貝氏貝諾孢子蟲LAMP試劑盒
Bibersteinia trehalosi海藻百伯史坦菌LAMP試劑盒
Bifidobacterium bifidum兩岐雙岐桿菌LAMP試劑盒
Bifidobacterium longum長雙歧桿菌LAMP試劑盒
Bifidobacterium spp.雙歧桿菌屬通用LAMP試劑盒
操作說明:
)對于常溫運輸?shù)募?xì)胞,收到細(xì)胞后,檢查是否有運輸問題,即細(xì)胞培養(yǎng)瓶或管是否破損,細(xì)胞培養(yǎng)液是否溢出。若沒有運輸問題,請75%酒精消毒后,保留封口膜,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置。嚴(yán)格檢查培養(yǎng)箱的參數(shù):溫度,濕度和CO2濃度。細(xì)胞靜置時間一般為6-2小時后,細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后,即可開始后續(xù)操作。選用正確的細(xì)胞培養(yǎng)體系,A2780(人卵巢癌細(xì)胞)嚴(yán)格按照說明書的培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)。條件允許,培養(yǎng)的前三天內(nèi)做細(xì)胞拍照記錄,通過郵件發(fā)送給我們做及時狀態(tài)跟蹤。
2)對于干冰運輸?shù)募?xì)胞,請取出冷凍管后,須立即放入37C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。然后將其復(fù)蘇培養(yǎng),次日更換培養(yǎng)液。