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毒理試驗中心-皮膚致敏試驗替代方法有哪些

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公司名稱中科檢測技術服務（廣州）股份有限公司
品牌其他品牌
型號
所在地廣州市
廠商性質生產廠家
更新時間2025/4/11 11:32:49
訪問次數68

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皮膚致敏試驗皮膚致敏試驗標準皮膚致敏檢測皮膚致敏檢驗皮膚致敏測試

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中科檢測技術服務（廣州）股份有限公司（中科檢測）是中國科學院控股有限公司（國科控股）旗下綜合性第三方檢驗檢測認證機構，前身是成立于1958年的中國科學院廣州化學研究所分析測試中心，是一家集檢驗檢測、認證鑒定、技術服務、咨詢培訓為一體的綜合性公共服務機構?！　?/p>

經過50多年的發(fā)展壯大，目前已成為廣東地區(qū)大型的第三方分析測試技術服務機構，具備廣東省科技廳認可的科研成果檢測資格，承擔科技部化學化工行業(yè)分析測試資源共享服務平臺建設項目，得到國家創(chuàng)新基金的支持，是廣東省危險化學品登記注冊辦公室認定測試單位。

中科檢測通過中國計量認證（CMA、CMA-F）及中國實驗室國家認可（CNAS），可向社會提供具有證明作用的測試數據和結果。中科檢測的管理體系符合ISO/IEC 17025和ISO/IEC 17020的要求，因而也是依據ISO 9001運作的。根據中國合格評定國家認可委員會與美國、歐盟、日本等國家和地區(qū)的認可機構達成的互認協(xié)議，中科檢測出具的數據和結果可獲得廣泛的互認。

公司秉承“檢測科學，數據公正，高效便捷，服務社會”的宗旨，與社會共發(fā)展。本著“客戶至上、質量*”的服務宗旨，本公司將不斷開拓創(chuàng)新，竭誠為業(yè)界提供很好的分析測試和技術咨詢服務。

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危廢檢測與鑒定，環(huán)境檢測，揮發(fā)性有機綜合治理與排查、危險廢物鑒別與評估管理、固體廢物綜合利用評價、土壤環(huán)境調查、風險評估、污染修復方案與效果評估、清潔生產審核驗收、突發(fā)環(huán)境事件風險評估、碳排放測算與評價、建設項目環(huán)境保護竣工驗收、突發(fā)環(huán)境事件應急預案、土壤檢測、土壤氡檢測、土壤檢測機構、環(huán)評土壤檢測、場地調查評估、土壤污染調查、環(huán)境風險評估、污染場地調查、場地環(huán)境調查機構、消毒產品檢測、消毒劑檢測、潔凈度檢測、凈化車間檢測、涉水產品檢測、涉水產品衛(wèi)生許可證、塑膠跑道檢測、鹽霧試驗、老化試驗、涂料檢測、農殘檢測、質量鑒定中心、質量司法鑒定機構、質量鑒定中心、食品級檢測

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皮膚致敏(Skin sensitization)即皮膚接觸過敏原后所產生的變應性應答，是一種由外源物質引發(fā)的IV型過敏反應。過敏性接觸性皮炎(Allergic contact dermatitis，ACD)作為皮膚致敏的臨床表型，在人群中發(fā)生率高達15%~20%。因此，皮膚致敏性評價是化學品毒性評價的重要內容之一。毒理試驗中心-皮膚致敏試驗替代方法有哪些

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皮膚致敏試驗替代方法有哪些

小鼠局部淋巴結試驗（LLNA）

目前，普遍認為LLNA和豚鼠最大值試驗仍是皮膚致敏性體內評價實驗的金標準。豚鼠最大值試驗通過觀察皮膚反應而進行定性檢測，而LLNA則依據淋巴細胞的增殖對受試物致敏性進行評價。皮膚致敏劑可誘導淋巴細胞增殖，通過氚化胸腺嘧啶脫氧核苷標記法、ATP生物發(fā)光法或BrdU酶聯(lián)免疫法可檢測淋巴細胞增殖。LLNA在一定程度上可減少動物使用和提升動物福利水平。此外，LLNA不能很好地區(qū)分致敏物和刺激物，且可能出現假陽性或假陰性結果。

KeratinoSensTM/LuSens試驗

研究表明Keap1(Kelch-like ECH-associatedprotein1)是抗氧化應答的主調控因子，并可與Nrf2(Nuclear factor(erythroid-derived2)-like2)相互作用，其對改善氧化應激至關重要。Keap1從轉錄因子Nrf2上解離，Nrf2隨后在核內聚集，并激活啟動子序列中具有ARE(Antioxidant Response Elements)的基因。

很多響應致敏劑作用的細胞標志物由Keap1-Nrf2-ARE通路所調控[?；谏鲜隼碚摚芯咳藛T開發(fā)出了KeratinoSensTM和LuSens兩種定量測試方法。KeratinoSenTM和LuSens的主要區(qū)別在于ARE元件來源，前者源于人AKR1C2(Aldo-ketoreductasefamily1member C2)基因，后者源自大鼠NQ01(NAD(P)H quinone dehydrogenase1)基因。經濟合作與發(fā)展組織(0rganization for Economic Cooperation and Development，0ECD)指南指出KeratinoSensTM試驗的陰性結果可能存疑，因為受試物若選擇性與賴氨酸殘基反應也可被評估為非致敏物[2.KeratinoSensTM/LuSens試驗也可能出現假陰性或假陽性結果，并且對含酐的待測物預測存在困難。

h-CLAT/U-SENS(Myeloid U937 skinsensitisation test)試驗

b-CLAT/U-SENS試驗主要利用皮膚致敏有害結局通路KE3(Keyevent3)：樹突狀細胞可與過敏原相互作用，攝取并呈遞過敏原表位至T淋巴細胞。而樹突狀細胞或單核細胞激活后其細胞表面標志物CD86或CD54會發(fā)生相應表達變化。h-CLAT是將待測物暴露于人單核細胞白血病細胞系THP-1.通過檢測細胞CD86和CD54的表達變化評估待測物的致敏性。與之類似U-SENS將受試物暴露于人淋巴癌細胞系U937并檢測細胞表面標志物CD86的變化。h-CLAT高度簡化，但其對角質化細胞缺乏作用，此外因其靈敏度低，對弱致敏劑預測較差。h-CLAT采用流式細胞術檢測，因而可能帶來熒光干擾和待測物的細胞毒性干擾。

重組人表皮致敏試驗

三維重組人表皮模型(RHE模型)由人源性表皮角質細胞組成，該模型于氣-液界面培養(yǎng)，因而可直接應用于化學品。據文獻報道，RHE模型呈現出與人皮膚類似的代謝能力，這提示RHE模型可代謝pre/pro-半抗原(pre/pro-hapten)，并用于評估相關化學品。SenCeeTox主要監(jiān)測8個Nrf2依賴基因，而SENS-IS則關注24個Nrf2-依賴基因和41個其他靶標基因。SENS-IS則通過65個靶標檢測炎癥和細胞保護應答，在對150個化學品測試中，與LLNA相比準確度達到100%。

EpiSensA則基于炎癥和細胞保護相關基因ATF3(Activating transcription factor 3)、1L-8、DNAJB4( DnaJ homolog subfamily B member 4)和GCLM( Clutamate-cysteine ligase modifier subunit )等進行檢測。

EpiSensA與LLNA相比，在29個親脂性化學品測試中，其靈敏度、特異性和準確度分別達到93%，100%和93%;另外在43個親水性化學品測試中(含11個pre/pro-半抗原)，其靈敏度、特異性和準確度分別達96%，75%和88%。

直接肽反應試驗（DRPA）

2004年，Gerberick等提出直接肽反應試驗該法將待測物與賴氨酸多肽孵育后，采用HPLC-UV檢測未與待測物共價結合的多肽。而后Gerberick等開發(fā)了一套基于多肽損耗和LLNA數據的預測模型，并采用庫珀統(tǒng)計法評估模型對致敏物的區(qū)分程度。研究表明，賴氨酸多肽1：50模型在多肽比率方面平衡較好，預測準確度達89%(81個待測物)。經過兩輪實驗室對比驗證，結果表明其重現性良好。研究人員將辣根過氧化物酶-過氧化氫( Horseradish Peroxidase and Hydrogen Peroxide， HRP/P)加入多肽孵育體系后，使得DPRA可檢測需酶介導激活的pro-半抗原，從而進一步拓展了DPRA的應用范圍。

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