501高效液相色譜測定水樣中的
儀器和試劑
1、儀器：
⑴STI501液相色譜儀梯度系統：
①流動相：乙腈、MQ水（由鋁箔紙包裹，防止其中產生藻類，堵塞進口）
②高壓：并聯式微體積柱塞往復泵
型號：P501
廠家：Science
③色譜柱：固定相填充物：十八碳（C18）
型號：Vertex C18
參數： 填充物粒徑：5 μm 內徑×長度：4.6×250 mm
④檢測器：紫外檢測器（UV）
型號：UV-501 電壓：230-210V
廠家：Science
⑤超聲波清洗裝置： 型號：SX-01
⑥進樣裝置：高壓六通進樣閥
兩個狀態(tài)： Load：樣品進入六通閥，未入色譜柱 Inject：位于六通閥的樣品進入色譜柱
⑦淋洗液（洗針、洗閥）：甲醇
⑵移液管 2 mL、5 mL各一支
⑶具塞離心管10 mL三支、1.5 mL一次性離心管一支
2. 試劑：甲醇（色譜純）； 標準使用溶液（10 mg/L）
待測水樣。
實驗步驟
1 標準系列配制
取標準使用液0.50、1.00、2.00 mL于10 mL的具塞離心管中，用甲醇定容至5 mL，混勻。待測。
2 樣品的制備
取水樣約1 mL于1.5 mL一次性離心管中。待測。
3 色譜參數
色譜柱：C18 柱；
流動相：乙腈、水；
梯度洗脫程序：
| 洗脫時間 | 0:00 | 4:00 | 4:01 | 5:00 | 5:01 | 8:00 |
| 乙腈（%） | 65 | 65 | 75 | 75 | 65 | 65 |
流速：1.0 mL/min；
柱溫：室溫；
進樣量：20 μL；
檢測器：紫外檢測器，檢測波長280 nm
測定
測定標準系列，再測定樣品。根據標準系列中的保留時間，定性確定樣品中的目標物。
記錄標準系列和樣品中目標物的峰面積。
數據記錄與計算
（1）標準系列c=4mg/mL的譜圖及樣品的譜圖：
樣品譜圖（圖2）中，三個明顯高的峰的記錄數據如下表
表1 樣品的譜圖中三個峰的特征數據
| | 保留時間（t/min） | 色譜峰面積/counts | 色譜峰高/mAU |
| 個峰 | 3.892 | 22907 | 2928 |
| 第二個峰 | 4.307 | 182.47 | |
| 第三個峰 | 4.879 | 20567 | |
圖1 標準系列c=4mg/mL的譜圖
圖2 樣品的譜圖
2. 標準系列和樣品中的保留時間、峰面積、峰高等實驗數據：
表2 標準系列和樣品中的譜圖峰的特征數據
| | 標準樣品體積/mL | 保留時間t/min | 色譜峰面積/counts | 色譜峰高/mAU | 濃度/(mg/mL) |
| 1 | 0.5 | 3.951 | 17640 | 1209 | 1.0 |
| 2 | 1.0 | 3.837 | 34754 | 2963 | 2.0 |
| 3 | 2.0 | 3.773 | 66625 | 5258 | 4.0 |
| 樣品 | － | 3.892 | 22907 | 2928 | 1.3 |
參考文獻：
關鍵詞：，高效液相色譜法，501液相色譜儀
