① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
產(chǎn)品名稱:人子宮平滑肌細(xì)胞
英文名稱:Human Uterine Smooth Muscle Cells
組織來源:子宮組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
人子宮平滑肌分離自子宮組織;子宮是孕育胎兒的器官,位于盆腔中部,膀胱與直腸之間,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持,這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時,可以引起子宮脫垂。子宮肌層比較厚,由成束或成片的平滑肌組成,肌束間以結(jié)締組織分隔。子宮平滑肌具有收縮功能,收縮受激素的調(diào)節(jié),其收縮活動有助于向輸卵管運(yùn)送、經(jīng)血排出以及胎兒娩出。子宮平滑肌層含有大量的血管,如果平滑肌層細(xì)胞過度生長,勢必造成血管壁的增厚,管腔堵塞,體外培養(yǎng)平滑肌細(xì)胞有利于研究子宮和其他富含血管器官的血管形成機(jī)制。子宮平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。子宮平滑肌細(xì)胞的主要功能:①子宮平滑肌能保持子宮的基本形態(tài),在孕期能大化的擴(kuò)張子宮容積,保證胎兒孕育環(huán)境;②平滑肌細(xì)胞有收縮舒張能力,在生產(chǎn)時能形成生理性的縮腹環(huán),推動胎兒向下移動,輔助生產(chǎn)。
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人子宮平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合組織貼塊法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人子宮平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
取材→分離→培養(yǎng)和維持
1、取材
人和動物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件,直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。
(1) 取材的基本要求
① 取材要注意新鮮和保鮮
② 應(yīng)嚴(yán)格無菌
③ 防止機(jī)械損傷
④ 去除無用組織和避免干燥
⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等
⑥ 作好記錄
2、分離
人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細(xì)胞結(jié)合緊密,不利于各個細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖,必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開,使細(xì)胞解離出來。
(1)懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
(2)實(shí)體組織材料的分離方法
對于實(shí)體組織材料,由于細(xì)胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細(xì)胞充分分散,形成細(xì)胞懸液,可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。
① 機(jī)械分散法
特點(diǎn):簡便、快速,但對組織機(jī)械損傷大,而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
② 消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動,使團(tuán)塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時再采用機(jī)械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散,制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個細(xì)胞的細(xì)胞懸液,接種培養(yǎng)后,細(xì)胞容易貼壁生長。
水樣中離子(Hg2+)濃度測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
水樣中六價鉻離子(Cr6+)濃度測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
組織無機(jī)0含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
組織總0含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
豚鼠孕激素(progestogen)試劑盒 ,英文名: progestogen ELISA Kit
Human proteoglycan (PG) ELISA Kit 人蛋白聚糖(PG)試劑盒
Monkeymaixmetalloproteinase11,MMP11ELISAKit基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforBMP-4(MouseBonemorphogeneticprotein4)ELISAKit小鼠骨成型蛋白4
細(xì)菌鎂離子濃度化學(xué)比色法定量試劑盒20次
rabbitmaixmetalloproteinase9,MMP-9ELISAKit兔子基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)試劑盒規(guī)格:96T/48T
SERPINA7重組小鼠 SerpinA7 / TBG 蛋白 Protein
CD133 造血干細(xì)胞抗原CD133 0.5mgCD133 造血干細(xì)胞抗原CD133
DKKL1重組人 DKKL1 / Soggy-1 / SGY-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
IGFBP7 Protein Human 重組人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白
SERPINE1 Protein Rat 重組大鼠 SerpinE1 / PAI-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
CD133 造血干細(xì)胞抗原CD133 0.5mgCD133 造血干細(xì)胞抗原CD133
IGFBP7 Protein Human 重組人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白
SERPINA7重組小鼠 SerpinA7 / TBG 蛋白 Protein
SERPINE1 Protein Rat 重組大鼠 SerpinE1 / PAI-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
DKKL1重組人 DKKL1 / Soggy-1 / SGY-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
人子宮平滑肌細(xì)胞大鼠內(nèi)皮脂肪酶(LIPG)試劑盒 ,英文名: LIPG ELISA Kit
Monkey ierleukin 6 (IL-6) ELISA Kit 猴白介素6(IL-6)試劑盒
Ratcardioophln1,CT-1ELISAKit 大鼠心肌營養(yǎng)素1(CT-1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGL1(HumanGlucoseanspoer1)ELISAKit人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1
細(xì)胞分泌型堿性0酸酶活性熒光定量試劑盒20次
RatStemCellFactorReceptor,SCFRELISAKit大鼠干細(xì)胞因子受體(SCFR)試劑盒規(guī)格:96T/48T
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用