產(chǎn)品名稱(chēng):人肺癌成纖維細(xì)胞
英文名稱(chēng):Human Pulmonary Cancer Fibroblast Cells
組織來(lái)源:肺癌
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
人肺癌成纖維分離自肺癌組織;肺癌是常見(jiàn)的肺原發(fā)性惡性腫瘤,絕大多數(shù)肺癌起源于支氣管粘膜上皮,故亦稱(chēng)支氣管肺癌。肺癌可向四周乃至全身擴(kuò)散。肺癌發(fā)病率和死亡率增長(zhǎng)快,對(duì)人群健康和生命威脅大的惡性腫瘤之一。近50年來(lái)許多國(guó)家都報(bào)道肺癌的發(fā)病率和死亡率均明顯增高,男性肺癌發(fā)病率和死亡率均占所有惡性腫瘤的位,女性發(fā)病率占位,死亡率占位。肺癌的病因至今尚不明確,大量資料表明,長(zhǎng)期大量吸煙與肺癌的發(fā)生有非常密切的關(guān)系。肺癌,其實(shí)不是一種病,而是幾十種病的組合,有多種亞型,多種特性;根據(jù)肺癌細(xì)胞在顯微鏡下的形態(tài)特點(diǎn),可以初步分為兩種類(lèi)型:小細(xì)胞肺癌(SCLC)15%和非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)85%。這兩種類(lèi)型肺癌的生長(zhǎng)特點(diǎn)、擴(kuò)散風(fēng)險(xiǎn)和治療方案均不相同。絕大多數(shù)肺癌是非小細(xì)胞肺癌,約占85%。它又能進(jìn)一步被分為三類(lèi),分別是:腺癌,鱗癌和大細(xì)胞癌。其中腺癌是主要的類(lèi)型,約占非小細(xì)胞肺癌中的50%。如果是不吸煙的女性患者,幾乎全部都是腺癌。人肺癌成纖維是肺癌組織中的癌相關(guān)成纖維細(xì)胞,癌相關(guān)成纖維細(xì)胞(cancer associated fibroblast,CAF)在腫瘤微環(huán)境中的重要作用已受到廣泛的重視。該細(xì)胞通過(guò)與癌細(xì)胞的直接接觸、分泌多種因子以及對(duì)腫瘤基質(zhì)的改造,促進(jìn)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移甚至耐藥性的發(fā)生。隨著研究的深入,有人提出CAF可能成為抗腫瘤治療的新靶點(diǎn)。然而CAF的分化來(lái)源多樣,相應(yīng)的形態(tài)和功能各異,因此深入了解CAF的分化來(lái)源有利于更全面地認(rèn)識(shí)腫瘤發(fā)展的機(jī)制,為臨床治療提供理論依據(jù),體外培養(yǎng)肺癌成纖維細(xì)胞對(duì)肺癌研究有重要意義。
實(shí)驗(yàn)室分離的人肺癌成纖維采用 - 膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)室分離的人肺癌成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳5代左右;3代以?xún)?nèi)狀態(tài)佳
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
人肺癌成纖維體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶(hù)協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿(mǎn)干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
T-25培養(yǎng)瓶充滿(mǎn)培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
取材→分離→培養(yǎng)和維持
1、取材
人和動(dòng)物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件,直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。
(1) 取材的基本要求
① 取材要注意新鮮和保鮮
② 應(yīng)嚴(yán)格無(wú)菌
③ 防止機(jī)械損傷
④ 去除無(wú)用組織和避免干燥
⑤ 應(yīng)注意組織類(lèi)型、分化程度、年齡等
⑥ 作好記錄
2、分離
人或動(dòng)物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細(xì)胞結(jié)合緊密,不利于各個(gè)細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長(zhǎng)繁殖,必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開(kāi),使細(xì)胞解離出來(lái)。
(1)懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來(lái)自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
(2)實(shí)體組織材料的分離方法
對(duì)于實(shí)體組織材料,由于細(xì)胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細(xì)胞充分分散,形成細(xì)胞懸液,可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。
① 機(jī)械分散法
特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大,而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
② 消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng),使團(tuán)塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時(shí)再采用機(jī)械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散,制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液,接種培養(yǎng)后,細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。
豬圓環(huán)病毒2型抗體ELISA檢測(cè)試劑盒
People four arachidonic acid (AA) ELISA Kit 人花生四烯酸(AA)檢測(cè)試劑盒
RabbitPlateletFactor4,PF-4ELISAKit 兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAPC(HumanactivatedproteinC)ELISAKit人活化蛋白C
血清脊髓過(guò)氧化酶(MPO)活性高質(zhì)敏感比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
Porcineierleukin3,IL-3ELISAKit豬白介素3(IL-3)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
F11R重組大鼠 JAM-A / F11R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
GFP 綠色熒光蛋白 0.5mgGFP 綠色熒光蛋白
IL1B重組人 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (pro form, His 標(biāo)簽) Protein
CDK2AP2 Protein Human 重組人 CDK2AP2 蛋白
CDNF Protein Mouse 重組小鼠 CDNF / ARMETL1 蛋白
GFP 綠色熒光蛋白 0.5mgGFP 綠色熒光蛋白
CDK2AP2 Protein Human 重組人 CDK2AP2 蛋白
F11R重組大鼠 JAM-A / F11R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CDNF Protein Mouse 重組小鼠 CDNF / ARMETL1 蛋白
IL1B重組人 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (pro form, His 標(biāo)簽) Protein
小鼠(Pepsin)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human phospholipase C gamma chain (PLC 1) ELISA Kit 人0酯酶Cγ鏈(PLCγ1)檢測(cè)試劑盒
HumanNa+/H+exchanger3,NHE3ELISAKit 人Na+/H+交換體3(NHE3)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ChickenIerleukin2,IL-2檢測(cè)試劑盒雞白介素2(IL-2)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞HISTONEH3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次
Mouseglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISAKit小鼠谷脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
人肺癌成纖維細(xì)胞小鼠仙臺(tái)病毒(Sendai)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠細(xì)小病毒(CPV)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝