產(chǎn)品名稱:Good RNAiMAX Transfection Reagent Good RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑
產(chǎn)品貨號:C0170-ZX03
產(chǎn)品規(guī)格:1.5ML
運(yùn)輸溫度:2-8℃
效 期:12個月
注意事項(xiàng):禁止冷凍
產(chǎn)品性能:
Good RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑適用于廣泛的細(xì)胞類型,包括但不限于MDA-MB-435、HeLa、HT1080、A549、HepG2、MCF7、SK-N-SH等細(xì)胞系,以及干細(xì)胞和原代細(xì)胞。轉(zhuǎn)染后無需去除轉(zhuǎn)染復(fù)合物或更換/添加培養(yǎng)基,簡化了實(shí)驗(yàn)操作流程。
使用說明:
轉(zhuǎn)染過程大多很簡單:混合核酸和轉(zhuǎn)染試劑,等幾分鐘,加到細(xì)胞中,幾天后分析。
具體步驟包括:
用Opti-MEM分別稀釋RNA分子和Good RNAiMAX,將兩者混合,室溫下孵育10-20分鐘。
加入培養(yǎng)細(xì)胞中,在37°C孵育24-48小時。
反向轉(zhuǎn)染是更快的操作方式,適合高通量轉(zhuǎn)染。反向轉(zhuǎn)染時,首先在孔內(nèi)制備復(fù)合物,然后再將細(xì)胞和培養(yǎng)基添加到孔板中。
使用RNAiMAX進(jìn)行轉(zhuǎn)染的優(yōu)點(diǎn)包括:
1. 高效性:能夠有效轉(zhuǎn)染多種難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型。
2. 低毒性:對細(xì)胞的毒性相對較低,適合長期實(shí)驗(yàn)和敏感細(xì)胞系的轉(zhuǎn)染。
3. 易操作:轉(zhuǎn)染過程簡單,易于控制和重復(fù)。
在使用Good RNAiMAX進(jìn)行轉(zhuǎn)染時,一般需要按照以下步驟操作:
1. 準(zhǔn)備細(xì)胞:確保細(xì)胞處于良好的生長狀態(tài),通常在轉(zhuǎn)染前24小時接種至適當(dāng)?shù)拿芏取?/span>
2. 制備轉(zhuǎn)染復(fù)合物:將Good RNAiMAX與siRNA或miRNA在無血清培養(yǎng)基中混合,形成復(fù)合物。
3. 轉(zhuǎn)染:將制備好的復(fù)合物加入到細(xì)胞培養(yǎng)基中,輕輕搖晃培養(yǎng)皿以確保均勻分布。
4. 培養(yǎng):根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),在適宜條件下培養(yǎng)細(xì)胞一定時間,以便觀察轉(zhuǎn)染效果。
5. 檢測:使用適當(dāng)?shù)姆椒z測基因沉默的效果,如實(shí)時定量PCR、Western blot等。
轉(zhuǎn)染用量:
96孔板:siRNA最終用量為1 pmol,Good RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑最終用量為0.3 μL。
24孔板:siRNA最終用量為5 pmol,Good RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑最終用量為1.5 μL。
6孔板:siRNA最終用量為25 pmol,Good RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑最終用量為7.5 μL。
(24孔板的每孔建議用量為1 μl)。
注意事項(xiàng):
RNAiMAX試劑在冰箱4℃保存,切記不能冷凍。
RNAiMAX試劑不宜在室溫放置過久,因此在制備轉(zhuǎn)染復(fù)合物前從冰箱拿出,加完后應(yīng)立即放回4℃再進(jìn)行后續(xù)操作。
轉(zhuǎn)染復(fù)合物制備完成后室溫孵育時間不得超過20分鐘。
通過以上信息,您可以更好地了解Good RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑的特點(diǎn)和使用方法。
需要注意的是,使用Good RNAiMAX進(jìn)行轉(zhuǎn)染時,要嚴(yán)格遵循制造商提供的說明書,以獲得的轉(zhuǎn)染效率和減少細(xì)胞損傷。此外,每次實(shí)驗(yàn)前好進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),以確定佳的siRNA或miRNA濃度和轉(zhuǎn)染條件。
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