DMEM-高糖液體無丙酮酸鈉、HEPES C0162-819 500ml

產品說明：

DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）高糖培養(yǎng)基是廣泛用于哺乳動物細胞培養(yǎng)的一種基礎培養(yǎng)基。其高糖版本含有較高的葡萄糖濃度，通常適用于對糖需求較高的細胞類型，比如某些類型的癌細胞或是快速增殖的細胞。

以下是使用DMEM高糖培養(yǎng)基的基本步驟：

 準備培養(yǎng)基

1. 配制培養(yǎng)基：

   - 如果使用的是干粉形式的培養(yǎng)基，首先制備新鮮的三蒸水或超純水。

   - 根據所需的最終體積稱量適量的干粉培養(yǎng)基，并將其溶解在大約半量的水中。

   - 溶解完畢后，補足剩余的水量至最終體積。

   - 攪拌直至溶解，確保沒有顆粒殘留。

2. 過濾除菌：

   - 使用0.22 μm的無菌過濾器過濾培養(yǎng)基，以除去可能存在的微生物。

3. 加熱滅菌（如果適用）：

   - 雖然過濾已經可以達到無菌，但有些實驗室可能會選擇高壓滅菌。

   - 然而，高壓滅菌可能會破壞培養(yǎng)基中的某些成分，因此不是必需步驟。

4.冷卻：

   - 將培養(yǎng)基冷卻至室溫或接近室溫，準備添加其他補充物。

添加補充物

1. 添加血清：

 一般添加10%的胎牛血清（FBS），但根據細胞類型和實驗目的，這個比例可能有所不同。

2. 添加抗生素：

   - 如雙抗，用于防止細菌污染。

3. 其他補充物：

   - 可能需要添加額外的氨基酸、維生素或其他營養(yǎng)補充物，這取決于具體的細胞培養(yǎng)需求。

 調節(jié)pH值

1.使用pH計：

   - 在無菌條件下，使用pH計將培養(yǎng)基的pH值調節(jié)到7.2-7.4之間。

   - DMEM培養(yǎng)基通常使用碳作為緩沖系統(tǒng)，需要在含有5-10% CO?的環(huán)境中維持生理pH值。

使用培養(yǎng)基

1.預熱：

   - 在使用前，將培養(yǎng)基預熱至37°C，以匹配細胞培養(yǎng)箱的溫度。

2.無菌操作：

   - 在細胞培養(yǎng)的所有步驟中，都應遵循無菌操作原則，以防止污染。

3. 避免凍融循環(huán)：

   - 一旦配制好的培養(yǎng)基應避免凍融，因為這可能影響其性能。

4. 使用期限：

   - 配制的培養(yǎng)基需要在兩周內使用完畢，以保證其質量和效果。

5. 細胞接種：

   - 將適當數量的細胞接種到含有DMEM高糖培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿或瓶中，按照細胞的生長特性進行后續(xù)的培養(yǎng)。

請記得，不同的實驗室和不同的細胞系可能有其特定的培養(yǎng)條件和偏好，因此上述指導原則可能需要根據具體情況作出調整。

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