LIMA激光波長可調(diào)的高光譜顯微鏡,400-2500nm,光學分辨率<5nm
加拿大Photon ect.的LIMA可調(diào)高光譜成像系統(tǒng)規(guī)格:
光學規(guī)格 | LIMA | ||
光學規(guī)格 | VIS400-1000nm | SWIR900-1620nm | e-SWIR1000-2500nm |
光學分辨率(FWHM) | 1.5-2.5nm | 3.0-5.0 | <5.0nm |
光譜通道 | 帶外抑制:<-60dB@±40nm | 帶外抑制:<-60dB@±80nm | |
空間分辨率 | 亞微米(受到光譜顯微鏡NA的限制) | ||
相機 | sCMOS | InGaAscamera (ZephIR™1.7orAlizé™1.7) | HgCdTecamera |
激發(fā)波長(高達3個) | 連續(xù)可調(diào) | ||
顯微鏡特點 | 科研級別的產(chǎn)品,可正放或倒放 | ||
波長分辨率精度 | FWHM/8(<0.7nm) | ||
掃描速度 | 20-50ms穩(wěn)定時間(步距0.01-10nm) | ||
XY方向的行程 | 76mm×52mm(搭配手動臺) | ||
Z軸分辨率 | 100nm | ||
白光照明 | 透射、反射,汞、鹵素 | ||
照明選項 | 高效率均勻光照明; | ||
數(shù)據(jù)處理 | 空間濾波,數(shù)據(jù)統(tǒng)計,光譜提取,數(shù)據(jù)歸一化,光譜標定,光譜疊加,中心位置圖 | ||
軟件配置 | 電腦(Windows10-64bits),PHySpec™控制分析軟件(含電腦) | ||
重量 | ≈80kg(總重量220磅,凈重180磅) | ||
尺寸 | 顯微鏡:31×85×82cm |
加拿大Photon ect.的LIMA可調(diào)高光譜成像系統(tǒng)附件及可選項:
20×,40×,50×,60×,100×(5×,10×規(guī)格可定制) | ||
機械電動臺 | 120×75×0.15mm,分辨率22nm | |
濾光輪 | 6個帶通濾波器 | |
第二相機的接口; | ||
光學臺建議搭配氣升式防震臺:900mm×1800mm×60mm(36”×72”×2.4”)或900mm×900mm×60mm(36”×36”×2.4”)光學臺緊挨著標準的900mm×900mm×60mm(36”×36”×2.4”)光學臺 |
Photon等為高光譜暗場成像提供了兩種方式:可調(diào)諧激光源(TLS)允許在激發(fā)中過濾,而IMA是提供發(fā)射過濾的平臺。TLS由兩個模塊組成:超連續(xù)譜激光器和基于Photon的體積布拉格光柵(VBG)技術的激光線可調(diào)濾波器(LLTF帶通濾波器)。IMA由高光譜成像濾波器、高光譜模塊濾波器組成,也基于VBG技術。當與配備暗場聚光鏡的科研級顯微鏡結(jié)合使用時,TLS和高光譜模塊濾波器可以將該顯微鏡轉(zhuǎn)變?yōu)楦吖庾V暗場設置。這些系統(tǒng)可在VIS(400-1000nm)、NIR(900-1620nm)或兩者(400-1620nm)光譜范圍內(nèi)連續(xù)可調(diào)。這種的平臺允許對納米材料進行深入表征,而無需任何特殊的樣品制備。
波長可調(diào)的高光譜顯微鏡是一種高光譜成像系統(tǒng),也叫作可調(diào)高光譜成像系統(tǒng)、可調(diào)激光源的高光譜成像系統(tǒng)、激光波長可調(diào)的高光譜顯微鏡。
TLS法得到的結(jié)果:下圖為使用高光譜暗場成像研究的靶向CD44+人乳腺癌細胞的金納米粒子(AuNP)顯示的3D圖像,此類空間和光譜信息對于改進復雜生物環(huán)境中基于納米等離子體的成像、疾病檢測和治療至關重要。該設置已成功用于在固定細胞制劑中對CD44靶向AuNP進行3D光譜定位和光譜鑒定。
上面a圖代表100×物鏡的焦平面在玻璃基板表面上時的暗場圖像,b圖代表100×物鏡的焦平面在人類乳腺癌細胞的頂面或細胞內(nèi)部時的暗場圖像。
上圖表示使用Photon等公司的高光譜暗場成像儀研究以3nm的步長從432nm到849nm改變激發(fā)波長,100nm金納米粒子的散射數(shù)據(jù)。圖a和圖b顯示了從數(shù)據(jù)中提取的高光譜結(jié)果,它對應圖c(典型的散射光譜)。波長的變化可以幫助識別粒子的大小,空間信息可以幫助評估它們的分布。
IMA法:使用60X物鏡,150x112μm2的區(qū)域在400nm到650nm范圍內(nèi)成像,步長為2nm,曝光時間為2秒。每個波長。在幾分鐘內(nèi),獲得了超過一百萬張光譜,每張光譜都覆蓋了整個可見光范圍。
上圖中,圖a中AuNps(60nm大?。擞浀娜巳橄侔┘毎陌祱鰣D像,圖b中綠色代表550nm處AuNP金納米粒子的單色圖像。圖c代表細胞放大圖,圖d代表含有AuNP的區(qū)域的光譜,這證實了60nm納米顆粒的存在。
那我我們的高光譜系統(tǒng)存在哪些優(yōu)勢呢?
相比常規(guī)的近紅外一區(qū)(700-900nm,NIR-I)熒光成像,近紅外二區(qū)(1000-1700nm,NIR-II)熒光成像優(yōu)勢很多,比如,其自發(fā)背景熒光較低,激光進入組織后穿透性更強,具有較高的信背比,且生物檢測的安全性更高。
系統(tǒng)支持暗場、或標準明場反射和透射成像,比逐點或基于線掃描的系統(tǒng)更快。
Photon ect.的LIMA可調(diào)激光源的高光譜成像系統(tǒng)特點:
-高光學分辨率<5.0nm
-高波長分辨率:FWHM/8(<0.7nm)
-高空間分辨率:亞微米(受到光譜顯微鏡NA的限制)
-科研級別的產(chǎn)品,可正放或倒放
-掃描速度快
-透射式照明、熒光照明
Photon ect.的LIMA激光波長可調(diào)的高光譜顯微鏡應用:
-生命科學(生物化學和納米傳感器、金納米粒子暗場成像)
-材料科學(鈣鈦礦(CIS)、銅銦鎵硒(CIGS)、硅(Si)、碳化硅(SiC)等光譜和空間分析)