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廣電計量檢測集團股份有限公司

光片熒光顯微鏡

參考價面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 公司名稱八帆儀器設(shè)備(上海)有限公司
  • 品       牌
  • 型       號
  • 所  在  地
  • 廠商性質(zhì)其他
  • 更新時間2024/2/18 13:53:27
  • 訪問次數(shù)96
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八帆儀器設(shè)備(上海)有限公司創(chuàng)建于2017年,是集測試測量、研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)為一體的高科技公司,亞太區(qū)總部位于中國上海。并在北京設(shè)立辦事處。 八帆儀器設(shè)備(上海)有限公司致力于代理和應(yīng)用進成熟的測試測量儀器及技術(shù),應(yīng)用于材料,物理,光學(xué),化學(xué),生物等領(lǐng)域。同時與國內(nèi)外研發(fā)機構(gòu)合作研究開發(fā)高精密測試測量技術(shù)及設(shè)備定制。 有各大國際品牌機構(gòu)的技術(shù)支持,匯集有行業(yè)的精英技術(shù)團隊,負責產(chǎn)品及方案設(shè)計、生產(chǎn)制造、售前售后服務(wù)、技術(shù)支持和應(yīng)用培訓(xùn)等等。公司的業(yè)務(wù)領(lǐng)域廣泛,但服務(wù)宗旨恒一,即不斷的改善管理、堅持服務(wù)質(zhì)量和真誠周到服務(wù)。 有廣大用戶的支持,我們相信八帆儀器設(shè)備(上海)有限公司一定能不斷為大家提供有高價值的產(chǎn)品。
光片熒光顯微鏡
光片熒光顯微鏡 產(chǎn)品信息
diSPIM是一種靈活和易于使用的實施選擇性平面照明顯微鏡(的SPIM),允許雙視圖(d樣品的),而安裝在一個倒置顯微鏡上(即SPIM的物鏡是直立)。diSPIM由NIH / NIBIB和應(yīng)用科學(xué)儀器(ASI)的Hari Shroff實驗室共同開發(fā)。SPIM也稱為光片熒光顯微鏡或LSFM,因為它使用光片或光平面垂直于成像方向照亮樣品。

什么是SPIM或LSFM?

選擇性平面照明顯微鏡(SPIM)是一種快速而柔和的成像技術(shù),將寬視野成像的速度與適度的光學(xué)切片和低的光漂白結(jié)合在一起。它已成為重要的熒光成像方式,尤其是對于體積成像。SPIM也稱為光片熒光顯微鏡(LSFM)或簡稱為“光片”。 SPIM或LSFM的定義特征是從側(cè)面對焦平面進行平面照明。在任何給定時間僅照亮樣品的一小部分,從而使光損傷最小化,并且提供光學(xué)切片,與寬視野落射熒光相比,可以提高SNR。由于以廣角(二維平行)方式收集圖像,因此,光片成像比點掃描共聚焦顯微鏡要快得多,點掃描共聚焦顯微鏡一次只能檢測一個像素。
光學(xué)薄片顯微鏡由于以下三個關(guān)鍵特性而迅速在體積成像中獲得普及:首先,由于將激發(fā)限制在焦平面附近,因此光損傷最小化,例如,生物存活的時間更長。第二,獲得良好的光學(xué)切片,通常接近共聚焦顯微鏡。第三,采集速度非??欤葌鹘y(tǒng)的共聚焦顯微鏡快幾個數(shù)量級。 SPIM的主要缺點是,需要額外的光學(xué)器件來生成光片。見的是,將一個單獨的照明物鏡與檢測物鏡正交放置,并將產(chǎn)生紙張的光學(xué)器件放置在該照明物鏡和激光源之間。添加額外的鏡頭會給成像系統(tǒng)和樣品安裝帶來空間限制。從本質(zhì)上講,顯微鏡需要圍繞樣品進行設(shè)計,因此存在各種各樣的光片顯微鏡設(shè)計,每種設(shè)計都不同的樣品和不同的安裝要求。相比之下,傳統(tǒng)的共聚焦或落射熒光顯微鏡只有一條光路,可以容納更多種類的樣品。換句話說,SPIM的優(yōu)點是以任何單個工具的適用范圍更窄為代價的。

方案

將兩個物鏡以直角放置在水平安裝在開放式培養(yǎng)皿中的樣品上方,每個物鏡與垂直方向成45度角。從一個物鏡創(chuàng)建一個光片,并使用另一個物鏡對其進行成像。通過將光片移動通過樣品來收集一堆圖像。對于某些應(yīng)用程序,單個視圖或堆棧中的3D信息就足夠了(iSPIM)。對于雙視圖系統(tǒng),兩個物鏡的作用相反,以從垂直方向收集另一個堆棧,然后可以將兩個數(shù)據(jù)集進行計算合并以生成具有各向同性分辨率的3D數(shù)據(jù)集(克服了通常的軸向分辨率差的問題從其他視圖獲取信息)。因此,雙視圖diSPIM具有兩條(通常是對稱的)光路,包括兩個掃描儀和兩個攝像頭。
diSPIM“頭”可以安裝在各種倒置顯微鏡上,包括ASI的RAMM框架。diSPIM系統(tǒng)可以從各種系統(tǒng)集成商處獲得。各種開源和專有軟件包可用于數(shù)據(jù)采集和數(shù)據(jù)處理。不論所使用的系統(tǒng)集成商和軟件如何,大多數(shù)底層顯微鏡硬件都是相同的。
diSPIM目標的選擇是有限的,因為它們必須共同聚焦而不互相碰撞。diSPIM的物鏡是40倍水浸物鏡,NA為0.8(Nikon CFI Apo 40XW NIR)。奧林巴斯20x / 0.5物鏡是另一種可能性1)尼康10x / 0.3。ASI和Special Optics共同開發(fā)了一種適用于diSPIM的透明組織物鏡,該物鏡可以以平板形式或在12 mm球形包膜中對高達5 mm深的透明組織進行成像。單面系統(tǒng)(iSPIM)具有更大的靈活性,因為照明物鏡可以是低NA長WD物鏡。 sCMOS相機于SPIM成像。配備了Hamamatsu Flash4,Andor Zyla,PCO Edge和Photometrics Prime 95B相機的diSPIM系統(tǒng)。 ASI制造了緊湊的光纖耦合2D振鏡或“掃描儀”,它是系統(tǒng)的組成部分。掃描儀的原始版本通過在一個軸上進行快速掃描來創(chuàng)建光片,并使用另一個軸將光片移動通過樣品2)。還提供帶有圓柱透鏡的掃描儀版本,用于產(chǎn)生靜態(tài)光片。激發(fā)激光(或激光發(fā)射)的輸出被簡單地饋送到掃描儀中。使用2×1光學(xué)開關(guān)或雙輸出激光發(fā)射非常有幫助,這樣激發(fā)就可以全部引導(dǎo)到有源光路中的掃描儀。
對于需要環(huán)境控制的應(yīng)用,diSPIM可以輕松地配備恒溫箱外殼和適當?shù)脑O(shè)備,以保持樣品的存活和快樂。 底部物鏡(倒置顯微鏡)通常具有較低的放大倍率物鏡和較便宜的用于定位樣品的照相機。可以輕松添加落射照明。

優(yōu)勢

像其他光片技術(shù)一樣,diSPIM僅照亮聚焦平面,因此是使活細胞和生物成像的理想選擇,因為它地減少了光漂白和光毒性效應(yīng)。與傳統(tǒng)或旋轉(zhuǎn)盤共焦系統(tǒng)相比,軸向分辨率提高了約2倍,光漂白減少了10倍以上,速度可與旋轉(zhuǎn)盤媲美。查看與confocal的更詳細的比較。 與許多其他光片實現(xiàn)相比,diSPIM的主要優(yōu)勢在于,與倒置顯微鏡類似,樣品的安裝非常簡單。見的是,將標本放在24 x 50 mm的蓋玻片上,蓋玻片固定在一個特殊的腔室中,該腔室可容納浸漬介質(zhì)。具有開放式安裝的其他燈片實現(xiàn)不具有各向同性分辨率。查看光片法的更詳細比較。 除了方便定位樣品外,底部物鏡還可用于光操縱(包括光遺傳學(xué))或其他實驗技術(shù)。它也可以用來提供樣本的第三張獨立視圖。這種靈活性也是diSPIM的優(yōu)勢。 diSPIM是一種模塊化顯微鏡,因此可以根據(jù)您的特定需求進行多種變化和添加。NIH研究人員,Applied Scientific Instrumentation等正在探索各種新功能和改進。請參閱部分變體列表。 diSPIM系統(tǒng)可從多個系統(tǒng)集成商處購買。與其他商用輕型薄板解決方案相比,它們便宜且靈活。與定制的SPIM / LSFM系統(tǒng)相比,它們易于獲取,使用和維護。另請參見SPIM技術(shù)的更完整的技術(shù)比較。

配置

ASI提供了所有必要的硬件來實現(xiàn)diSPIM,這是一種靈活且易于使用的選擇性平面照明顯微鏡(SPIM)實現(xiàn),可在安裝在倒置(i)上的情況下實現(xiàn)樣品的雙視圖(d)。顯微鏡。diSPIM“頭”可以安裝在各種倒置顯微鏡上,包括ASI的RAMM框架。 ASI制造光機械元件,包括電動平臺,用于創(chuàng)建和移動光片的2D振鏡,以及壓電物鏡移動器。需要物鏡,激光和照相機來完成系統(tǒng);用戶可以自己購買其他物品,使用出售diSPIM的各種系統(tǒng)集成商的服務(wù),或通過ASI購買它們。 diSPIM已在蓋玻片上培養(yǎng)的細胞,嵌入在學(xué)院凝膠上的細胞c上成功進行了測試。線蟲和斑馬魚的胚胎,以及許多其他樣本。

單面系統(tǒng)(iSPIM)

從一個物鏡創(chuàng)建并使用另一物鏡成像的光片。通常通過使用掃描儀(galvo)移動光片,使光片穿過樣品,該掃描器與移動成像物鏡的壓電平臺同步。
  • 優(yōu)勢:的購置,的,直接的設(shè)置。
  • 缺點: XY分辨率優(yōu)于Z分辨率。
  • 雙面系統(tǒng)(diSPIM)

    雙方都有光片掃描儀,壓電物鏡定位器和相機。在實驗過程中,從兩個視圖中都收集了一堆圖像,并且可以將兩個數(shù)據(jù)集進行計算合并以生成具有各向同性分辨率的3D數(shù)據(jù)集(另一個視圖中的信息克服了通常的軸向分辨率差的問題)。如果需要,可以單面模式運行。
  • 優(yōu)勢:XY和Z分辨率都非常好–結(jié)合了速度和分辨率,這是活細胞成像所的。
  • 缺點:需要購買更多的硬件。各向同性分辨率所需的數(shù)據(jù)后處理。
  • 產(chǎn)品對比
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