Thermo Scientific 微球菌核酸酶 (MNase) 適用于從細(xì)胞裂解物中去除核酸，釋放染色質(zhì)結(jié)合蛋白并剪切染色質(zhì)以便用于染色質(zhì)免疫沉淀 (ChIP) 實(shí)驗(yàn)。

微球菌核酸酶 (MNase) 的特點(diǎn)：

•酶切核酸（DNA 和 RNA）
• 高效處理雙鏈、單鏈、環(huán)狀和線性核酸
•在含有二價(jià)鈣離子的中性至堿緩沖液條件中具有活性
•以 ≥100 單位/µL 的規(guī)格提供，溶于10 mM Tris-HCl（pH 值 7.5）、50 mM NaCl、1 mM EDTA、50% 甘油中

該微球菌核酸酶是衍生酶的一種穩(wěn)定液體形式。微球菌核酸酶 (MNase) 表現(xiàn)出針對(duì) DNA 和 RNA 的外切和內(nèi)切-5'-磷酸二酯酶活性。該酶可消化各種雙鏈、單鏈、環(huán)狀和線性核酸?；钚悦嫦騿捂満怂岬孜铮?yōu)先針對(duì)AT-或AU-富集區(qū)域。酶活性發(fā)生于 pH 值 7 至 10 條件下，且在酶切 RNA 和 DNA 底物方面依賴于鈣。微球菌核酸酶適用于從細(xì)胞裂解物中去除核酸，釋放染色質(zhì)結(jié)合蛋白并剪切染色質(zhì)以便用于染色質(zhì)免疫沉淀 (ChIP) 實(shí)驗(yàn)。

微球菌核酸酶 (MNase) 的特性：
• 產(chǎn)品為 -20°C 的液體。使用期間將酶放置在冰上。
• 微球菌核酸酶活性依賴于 Ca++。在反應(yīng)緩沖液中避免鈣螯合劑，如EGTA。
•在 pH 值為 7 至 10 且鹽濃度小于 100 mM 時(shí)，酶具有活性。酶活性發(fā)生在 37°C 下；但在室溫下酶具有活性。單價(jià)金屬離子（如 Na+ 和 K+）會(huì)降低活性。EGTA 或加熱至 65°C 并保持 10 分鐘可使酶失活。

微球菌核酸酶 (MNase) 使用的通用方案：
• 在 50 mM Tris-HCl（pH 值 8.0）、5 mM CaCl₂ 中稀釋樣品
• 如果樣品僅包含核苷酸（即，無(wú)蛋白），添加 BSA 使其最終濃度為 0.1 mg/mL。
•添加微球菌核酸酶并在 37°C 下孵育反應(yīng)，直至核苷酸被降解。
• 可選：通過(guò)添加 EGTA（pH 值 8.0）至最終濃度為 20 mM，停止反應(yīng)。

微球菌核酸酶（產(chǎn)品編號(hào) 88216）的規(guī)格：
• 外觀：透明、無(wú)色液體，不含不可溶物質(zhì)。
•單位：≥100 單位/µL
• 其它信息：1 單位定義為在 25°C 下，高度聚合 DNA 使 260 nm 處吸光度增加 0.001/min/mL 所需的酶量。

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Pierce™ 細(xì)胞裂解通用核酸酶