Ex (nm) | - | Em (nm) | - |
分子量 | N/A | 溶劑 | Water |
存儲(chǔ)條件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
Transfectamine mRNA轉(zhuǎn)染試劑 是一種功能強(qiáng)大且用途廣泛的轉(zhuǎn)染試劑,旨在將更高量的 mRNA 引入真核細(xì)胞,或者更具體地說,引入動(dòng)物細(xì)胞。它在各種貼壁和懸浮細(xì)胞系(包括難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞)中提供高轉(zhuǎn)染效率。不需要核攝取,這導(dǎo)致比 DNA 轉(zhuǎn)染更快的蛋白質(zhì)表達(dá),而沒有基因組整合的風(fēng)險(xiǎn)。 轉(zhuǎn)染試劑的低毒性可提高轉(zhuǎn)染細(xì)胞的活力。 轉(zhuǎn)染試劑不需要特殊培養(yǎng)基,與大多數(shù)商業(yè)轉(zhuǎn)染試劑相比更易于使用。百螢生物為您提供優(yōu)質(zhì)的Transfectamine mRNA轉(zhuǎn)染試劑 。
樣品實(shí)驗(yàn)方案
簡(jiǎn)要概述
1.準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染細(xì)胞
2.制備轉(zhuǎn)染試劑-RNA 混合物
3.將轉(zhuǎn)染試劑-RNA 混合物添加到細(xì)胞培養(yǎng)物中
4.過夜培養(yǎng)細(xì)胞
5.用合適的方法分析轉(zhuǎn)染效率
細(xì)胞準(zhǔn)備
1.在轉(zhuǎn)染時(shí)將細(xì)胞培養(yǎng)至 ~ 90% 匯合。
2.轉(zhuǎn)染前更換新鮮培養(yǎng)基。例如,6 孔板每孔更換 2 mL 培養(yǎng)基,10 cm 板更換 6 mL 培養(yǎng)基。
工作溶液配制
1.T轉(zhuǎn)染試劑-RNA 混合物
2.將 2.5 µg mRNA 與 200 µL 無(wú)血清培養(yǎng)基混合。
3.在步驟 1 中加入 7.5 µL 轉(zhuǎn)染試劑。
4.混勻并在室溫下孵育 20 分鐘。
注意:轉(zhuǎn)染試劑與 mRNA 的比例需要針對(duì)不同的細(xì)胞系進(jìn)行優(yōu)化。 通常,轉(zhuǎn)染試劑 (µL) 與 mRNA (µg) 的比率 =(3 至 5 µL)至 1 µg。
6孔板樣品方案
組分 | 6孔板(每孔) |
新鮮培養(yǎng)基 | 2ml |
純化的mRNA | -2.5ug |
無(wú)血清培養(yǎng)基 | 200ul |
操作步驟
1.轉(zhuǎn)染方案
1.1將轉(zhuǎn)染試劑 - mRNA 混合物加入培養(yǎng)板并培養(yǎng)過夜。
注意:重組蛋白表達(dá)可以在轉(zhuǎn)染后的8小時(shí)內(nèi)檢測(cè)到。 轉(zhuǎn)染后約24小時(shí)可觀察到表達(dá)水平。