非瘟熒光定量pcr檢測(cè)儀的原理與常規(guī)PCR檢測(cè)類似，但使用特定的引物和探針來識(shí)別非瘟(非洲豬瘟)病毒。
非瘟熒光定量pcr檢測(cè)儀通常由以下幾個(gè)主要組成部分構(gòu)成：
1. PCR儀器：這是核心部件，用于執(zhí)行PCR反應(yīng)。它包括溫控系統(tǒng)、光學(xué)系統(tǒng)和放大系統(tǒng)等，能夠提供穩(wěn)定的溫度環(huán)境，并進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)。
2. 熒光檢測(cè)系統(tǒng)：該系統(tǒng)可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)PCR反應(yīng)過程中熒光信號(hào)的變化。根據(jù)熒光信號(hào)的強(qiáng)度和曲線特征，可以確定樣本中是否存在非瘟病毒。
3. 數(shù)據(jù)分析軟件：通常，配備了相應(yīng)的數(shù)據(jù)分析軟件，可以自動(dòng)解析并呈現(xiàn)PCR反應(yīng)結(jié)果。這些軟件通常具有用戶友好的界面，方便操作人員對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析和解釋。
4. 試劑盒：作為補(bǔ)充，通常需要使用特定的試劑盒，包括引物(primers)和探針(probes)。這些試劑盒是針對(duì)非瘟病毒基因組的特異性設(shè)計(jì)，可以增加PCR反應(yīng)的特異性和靈敏度。
總之，非瘟熒光定量檢測(cè)儀是一種用于快速、準(zhǔn)確檢測(cè)非瘟病毒的工具。它在非洲豬瘟的防控中起著關(guān)鍵作用，幫助飼養(yǎng)業(yè)者及時(shí)發(fā)現(xiàn)和控制非瘟病毒的傳播。
基本步驟如下：
1. 提取樣品中的病毒核酸(RNA或DNA)。
2. 在PCR反應(yīng)管中加入提取得到的核酸模板，以及用于擴(kuò)增病毒基因組的特定引物(兩個(gè)寡核苷酸序列)。
3. 設(shè)置PCR反應(yīng)體系，包括緩沖液、脫氧核苷酸(dNTPs)、聚合酶等。
4. 進(jìn)行PCR循環(huán)反應(yīng)，包括三個(gè)主要步驟：變性、退火和延伸。在變性步驟中，模板DNA會(huì)被加熱使其解離成單鏈。在退火步驟中，引物結(jié)合到目標(biāo)DNA上。在延伸步驟中，聚合酶利用dNTPs合成新的DNA鏈。
5. PCR循環(huán)完成后，可以通過熒光探針檢測(cè)放大的DNA。熒光探針是一種含有熒光染料和輔助染料的短寡核苷酸序列。當(dāng)探針與目標(biāo)DNA序列結(jié)合時(shí)，熒光染料會(huì)釋放出熒光信號(hào)。
6. 檢測(cè)儀通過檢測(cè)熒光信號(hào)的強(qiáng)度來確定樣品中非瘟病毒的存在量。根據(jù)熒光信號(hào)和已知標(biāo)準(zhǔn)曲線，可以計(jì)算出樣品中病毒的數(shù)量。
總結(jié)起來，非瘟熒光定量檢測(cè)儀利用PCR技術(shù)擴(kuò)增非瘟病毒核酸，并通過熒光探針檢測(cè)熒光信號(hào)的強(qiáng)度來定量病毒數(shù)量。
