實現常規(guī)熒光共聚焦成像和快速光譜成像的結合

隨著科研人員需求的不斷增加，探測到更多的信號甚至是光譜信息變得越來越必要，尤其在區(qū)分顏色比較接近的熒光的時候。創(chuàng)新的A1si激光共聚焦顯微鏡帶給用戶的靈活性，高速度以及光譜功能，遠遠超出常規(guī)共聚焦顯微鏡。配備的常規(guī)熒光探測器和光譜探測器，可以滿足多種科研領域的應用需求。

單次掃描即可獲得320nm帶寬的光譜圖像
波長分辨率可以是2.5, 5,和 10 nm. 選用10 nm分辨率時, 單次掃描可獲得的波長范圍高達320 nm，遠遠超出其他類似系統(tǒng)。

1） 簡單，靈活的顯微鏡控制

只需單擊*個圖標，即可實現目鏡觀察和共聚焦拍攝之間的光路切換。通過A1si的系統(tǒng)軟件，用戶可以輕松控制顯微鏡的各個部件，將更多的時間用于拍攝圖像。

2） 透射光拍攝

在拍攝光譜圖像和標準共聚焦圖像的同時，A1si還可以拍攝包括DIC，明視場，相差在內的透射光圖像，以便在組織和細胞中更*的進行熒光標記的定位。

3） FRAP觀察

通過macro程序，可以進行FRAP (Fluorescence Recovery After Photobleaching光漂白后的熒光恢復) 實驗. 激光**定位到用戶的任意區(qū)域（圓形，矩形，任意多邊形，點，線，甚至環(huán)形）進行光漂白。其他FRAP技術，包括iFRAP (interval FRAP) 和FLIP (Fluorescence loss in Photobleaching)同樣得到支持。

4） 對光譜圖像進行時間動態(tài)記錄

由于單次拍攝即可得到全光譜圖像，所以A1si可以對光譜圖像進行動態(tài)拍攝。拍攝時間序列的模式有：模式/固定時間間隔模式/用戶自定義拍攝時間表模式）

5） 對熒光信號進行光譜拆分，消除串色

A1si 軟件可以將不同熒光探針的信號清楚地拆分開，包括光譜接近，大范圍重疊的熒光信號（比如CFP, RFP, YFP,和 Alexa488）. 在觀察多重熒光染色來定位蛋白分子， FRET 實驗時，這個功能非常有用.通過光譜拆分，還可以清除掉自發(fā)熒光信號。

6） 高效率的熒光透過技術

熒光光纖和探測器表面都使用了高效防反射涂層，將熒光信號的損失降到**，實現光路的高透過率。

7） 高波長分辨率

通過使用精密設計的衍射光柵，可以實現高達2.5nm的光譜分辨率.此外還有5nm 和 10nm分辨率可選。不同的分辨率可以分別用來拆分光譜重疊的探針或同時對4個或更多的探針進行拍攝。

8） 采用偏光控制技術的光譜探測器

Nikon的DEES (Diffraction Efficiency Enhancement System衍射效率增強系統(tǒng)) **技術可以對偏振光進行控制，從而實現亮度的**化。通過調整偏振光方向，衍射光柵的效率得到**化，從而在從藍到紅的整個可見光范圍內提高廣譜數據的亮度和線性。

9） 拍攝到真實的熒光顏色

由于采用了新的**矯正技術，而且光譜分辨率和針孔大小無關，A1si可以**探測到光譜信號，得到真實顏色。同其他的偽彩色系統(tǒng)相比，A1si可以實時觀察到真彩色的樣本。

用 A1si得到的廣譜數據和探針制造商提供的數據非常接近。

10） 把對活細胞和組織的影響降到**

通過單次激發(fā)*可以得到全光譜圖像，因此激光強度和PMT增益的調節(jié)變得簡單而快速。同時把熒光信號的衰減以及激光對標本的損傷降到**。對于活細胞和組織，A1si是*套“溫柔”的系統(tǒng)。

11） 同時拍攝32通道的光譜圖像

A1si 采用了32 通道PMT，并革新了多重高速數字轉換電路和LVDS(Low Voltage Differential Signal低壓差分信號)高速串行傳輸技術,創(chuàng)造性地實現了單詞掃描得到32通道光譜信息，大大減少了拍攝時間，并實現了實時觀察。

12） 雙積分信號處理

新開發(fā)的DISP (Dual Integration Signal Processing雙積分信號處理) 技術提高了電子效率，避免了模/數轉換過程中熒光信號的損失。整個曝光期間，熒光信號得到全程記錄，有效提高了信噪比。