ATS 293細胞裂解設(shè)備細胞破碎儀
ATS 293細胞裂解設(shè)備細胞破碎儀 設(shè)計原理與技術(shù)參數(shù):
ATS 細胞破碎機主要從三個方面對設(shè)備進行設(shè)計,用以滿足細胞破碎提取病毒方面的要求:
1. ATS 專有的內(nèi)置冷卻模塊,可以保證破碎過程中樣品都處在 4 度的低溫狀態(tài)
2. ATS 柱塞設(shè)計為 2 級夾套隔離,可保證與樣品接觸的那部分柱塞不與外界接觸,進一步可保證生產(chǎn)過程中樣品不會染菌,同時設(shè)備可以通蒸汽滅菌,也可以用0.5mol以上濃度的 NAHO 溶液浸泡殺菌。
3. ATS 針對哺乳動物細胞破碎設(shè)計的壓力微調(diào)模塊,破碎壓力可以精準調(diào)節(jié),精度可達到 1bar,調(diào)節(jié)后的壓力波動范圍在±5bar內(nèi),可以保證壓力穩(wěn)定,不會破壞病毒的結(jié)構(gòu)。
293細胞傳統(tǒng)裂解方式
█ 機械裂解
1. 反復冷凍、解凍再進行低速離心的方法,該方法耗時很久;
2. 采用超聲波進行高頻振蕩空穴效應進行破碎,對超聲工藝要求高,且病毒滴度會受影響。
█化學裂解
采用triton-100表面活性劑進行裂解,增加后續(xù)純化難度,且降解后產(chǎn)物會對環(huán)境產(chǎn)生影響。
ATS 細胞裂解儀優(yōu)勢
1. 裂解結(jié)構(gòu)成熟,裂解率超99%
2. 通道小,最小3ml即可處理
3. 有一定剪切力,可斷裂染色體DNA,降低黏度,有利于后續(xù)提純
4. 處理速度快。一次可處理3-500ml樣品,幾分鐘即可處理完畢
5. 機械裂解,無后續(xù)去除步驟
6. 氮氣動力,平穩(wěn)的壓力輸出,批次重復性好
7.操作便捷,使用簡單
生物工藝過程流程圖
如圖所述,細胞破碎是分離純化的關(guān)鍵步, 經(jīng)過發(fā)酵得到細胞后,由于目的產(chǎn)物都在細胞的內(nèi)部,需用通過高壓細胞破碎儀,將細胞破碎開,把胞內(nèi)產(chǎn)物釋放出來,后續(xù)的分離純化才好進行。
ATS細胞破碎設(shè)備
細胞破碎關(guān)鍵技術(shù)細節(jié)
破碎率控制
不同的細胞所需要的破碎壓力都不一樣,ATS 高壓細胞破碎的壓力可以從 0-2000bar 自由調(diào)節(jié),可以滿足幾乎所有常用表達體系的細胞破碎的需求。
溫度控制
由于破碎過程中隨著壓力的升高,樣品溫度也會升高,當壓力每升高 100bar,樣品的溫度會升高 2.2℃,生物樣品都需要保持低溫才能保證樣品的活性,ATS 專業(yè)的內(nèi)置冷卻模塊,可通 4℃的冷凍水直接在樣品破碎產(chǎn)熱點對樣品降溫,所產(chǎn)生的熱量瞬間就會被吸走,可保證樣品溫度一直處在低溫狀態(tài),樣品活性不受影響。
案例與應用
大腸桿菌破碎介紹/典型應用:
大腸桿菌一般需要800-1000bar的壓力破碎2-3遍,破碎率可以達到99%以上,常見的典型應用:胰島素 、干擾素、 白介素 酶等。
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