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廣電計(jì)量檢測(cè)集團(tuán)股份有限公司

DNA測(cè)序服務(wù) 檢測(cè)服務(wù)

參考價(jià) 15
訂貨量 ≥1個(gè)
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱上海閃晶分子生物科技有限公司
  • 品       牌其他品牌
  • 型       號(hào)
  • 所  在  地上海市
  • 廠商性質(zhì)生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間2023/5/23 12:41:21
  • 訪問次數(shù)262
產(chǎn)品標(biāo)簽:

DNA測(cè)序服務(wù)測(cè)序

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上海閃晶生物科技有限公司2004年成立于上海,是一家長期致力生物醫(yī)藥研發(fā)外包服務(wù)的公司,現(xiàn)階段業(yè)務(wù)內(nèi)容主要有引物探針合成、基因合成多肽合成、蛋白表達(dá)純化服務(wù)、熒光定量PCR服務(wù)、抗體制備服務(wù) 、SNP分析慢病毒包裝等相關(guān)服務(wù),同時(shí)提供部分診斷試劑原料和試劑。公司坐落于上海市紫竹科技園附近,毗鄰上海交大、華東師范大學(xué)及國際跨國公司;學(xué)術(shù)氛圍濃郁,具有得天獨(dú)厚的人文環(huán)境。閃晶公司始終以“專業(yè)公司,打造專業(yè)服務(wù)'為理念,努力為客戶提供服務(wù)。


抗體,技術(shù)服務(wù),生化試劑,實(shí)驗(yàn)室耗材
DNA測(cè)序技術(shù)主要依據(jù) Sanger 的雙脫氧鏈終止法。以DNA單鏈為模板,在特定條件下,用特異的引物在測(cè)序級(jí)DNA聚合酶的作用下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,不斷將 4 種脫氧核糖核苷酸 (dNTP) 加到引物的 3'- 羥基末端并使引物鏈得到延伸。
DNA測(cè)序服務(wù) 檢測(cè)服務(wù) 產(chǎn)品信息

DNA測(cè)序原理

DNA測(cè)序技術(shù)主要依據(jù) Sanger 的雙脫氧鏈終止法。以DNA單鏈為模板,在特定條件下,用特異的引物在測(cè)序級(jí)DNA聚合酶的作用下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,不斷將 4 種脫氧核糖核苷酸 (dNTP) 加到引物的 3'- 羥基末端并使引物鏈得到延伸。這種鏈的延伸是通過引物的 3'- 羥基和脫氧核糖核苷酸底物的 5'- 磷酸基團(tuán)形成磷酸二酯鍵來完成的。如果這種反應(yīng)體系中加入雙脫氧核糖核苷酸 (ddNTP) ,這種 2'3'ddNTP 的 5'- 磷酸基團(tuán)是正常的 (4 種不同的熒光標(biāo)記 ) ,而 3' 位置缺少羥基,因此在 DNA 聚合酶作用下,仍然可以通過 5'- 磷酸基團(tuán)與引物鏈的 3'- 羥基反應(yīng)摻入到引物鏈中,但是由于 ddNTP 沒有 3'- 羥基,不能繼續(xù)與下一個(gè) 5'- 磷酸基團(tuán)形成磷酸二酯鍵而導(dǎo)致引物鏈延伸的終止。這樣,在測(cè)序反應(yīng)體系中, DNA 引物鏈不斷合成與偶然終止,產(chǎn)生一系列的長短不等的核苷酸鏈,然后將這些反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行電泳,即可得測(cè)序圖譜。

樣品要求

樣品類型

相應(yīng)要求

 

 

菌體

1. 說明載體抗性類型,我們提供 Amp, Kan, Tet 及 Chl 四種抗生素。
2.   提供 1ml 左右過夜培養(yǎng)的菌液,加 15% 滅菌甘油,于 Eppendorf 管中封口保存,防止交叉污染或滲漏。
3.   大量樣品測(cè)序,建議在一次性塑料培養(yǎng)皿固體培養(yǎng)基上穿刺培養(yǎng)。
4.   建議盡量提供穿刺培養(yǎng)的菌種。

 

質(zhì)粒

1. 質(zhì)粒溶于適量體積雙蒸水中(不含 TE ),電泳檢測(cè)總量大于 2mg 。

2. 建議用相關(guān)試劑盒純化。
3. 如有可能,同時(shí)提供 1ml 含有相應(yīng)質(zhì)粒的菌液備用。
4. 大質(zhì)粒必需注明載體長度。

 

未純化 PCR 產(chǎn)物

1. 片段大于 150bp 。
2. 提供 50ul ~ 100ul PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物 ( 總量 500ng-1ug) 。
3. 取 3ul 樣品,電泳檢測(cè)應(yīng)為明亮的一條帶,無雜帶。

 

純化 PCR 產(chǎn)物

1.PCR 產(chǎn)物溶于雙蒸水中(不含 TE )。

2. 濃度大于 20ng/ul ,體積大于 20ul ,長片段需適當(dāng)增加量。
3. 電泳檢測(cè)條帶專一。

自備的引物

1. 濃度不低于 5pmole/ul( 或 5umol/L) ,體積大于 20ul 。
2. 隨機(jī)引物和簡并引物不能用于測(cè)序。
3. 盡可能提供引物全序列、 PCR 退火溫度,以供參考。


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