Ru Red核酸染料 染色液是一種結(jié)合于所有dsDNA雙螺旋小溝區(qū)域的具有特別涉及的熒光染料。在游離狀態(tài)下，Ru Red發(fā)出微弱的熒光，但一旦與雙鏈DNA結(jié)合后，熒光大大增強(qiáng)。因此，Ru Red的熒光信號強(qiáng)度與雙鏈DNA的數(shù)量相關(guān)，可以根據(jù)熒光信號檢測出PCR體系存在的雙鏈DNA數(shù)量。Ru Red與 EB 有相同的光譜特性，無需改變?yōu)V光片及觀察裝置。標(biāo)準(zhǔn)的 EB 濾光片或 SYBR 濾光片都適用，使用與觀察 EB 相同的普通紫外凝膠透射儀觀察即可，在 300 nm 紫外光附近可得到激發(fā)。Ru Red的吸收波長約為518 nm，發(fā)射波長大約為605 nm。Ru Red 與雙鏈DNA的親和力非常高，因此可以用做電泳前染色，對分子生物學(xué)中常用的酶（如：Taq 酶、逆轉(zhuǎn)錄酶、內(nèi)切酶、T4連接酶等）沒有抑制作用。另外，Ru Red 與EB相比，誘變能力大大降低。
Ru Red是高靈敏的DNA熒光染料，適用于各種電泳分析，操作簡單：無須脫色或沖洗。至少可檢出20pg DNA，高于EB染色法25-100倍。Ru Red 與dsDNA 結(jié)合熒光信號會增強(qiáng)800-1000倍，用Ru Red染色的凝膠樣品熒光信號強(qiáng)，背景信號低?？蛇m用于多種電泳分析。
Ru Red 適合于多種凝膠電泳方法：瓊脂糖凝膠，聚丙烯酰胺凝膠電泳，脈沖電場凝膠電泳，和毛細(xì)管電泳等。Ru Red 核酸凝膠染液(Ru Red Nucleic Acid Gel Stains)是一種高敏感性的熒光染液，用于檢測瓊脂糖凝膠及聚丙烯酰胺凝膠中的雙鏈DNA和寡核苷酸。當(dāng)染液與核酸結(jié)合后，Ru Red 核酸凝膠染液的熒光信號會明顯增強(qiáng)，因此經(jīng)Ru Red 核酸凝膠染液染色的凝膠顯示出非常好的信躁比，沒有背景熒光。為獲得的結(jié)果，凝膠在跑膠后再進(jìn)行染色。Ru Red 核酸凝膠染液用于低含量的PCR產(chǎn)物，凋亡研究及異源雙鏈分析中少量DNA的檢測較為理想?？蓱?yīng)用于：DNA和RNA的檢測；SSCP及異源雙鏈分析。百螢生物為您提供優(yōu)質(zhì)的Ru Red核酸染料 染色液。
實(shí)驗(yàn)方案
1.Ru Red預(yù)染方法
1.1該方法適用于瓊脂糖凝膠電泳
1.2按照實(shí)驗(yàn)要求配制一定濃度的瓊脂糖凝膠溶液并用微波爐或其他工具加熱熔解。
1.3待加熱后的瓊脂糖凝膠溶液稍涼（約50-70℃），按1:10000比例加入Ru Red 原液搖勻（使Ru Red工作濃度為1 x）。
1.4倒膠固定，使自然凝固。
1.5加樣、電泳，電泳程序根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求。
1.6凝膠觀測，成像分析。觀測波長與EB相同，也可用SYBR or GelStar等濾光片成像，效果相同。
2.Ru Red后染方法
2.1按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
2.2用PH 7.0 - 8.5 的緩沖液（如：TAE，TBE 或 TE），按照3300：1的比例稀釋Ru Red濃縮液，混勻，制成3X染色溶液。
2.3將3X染色溶液倒入合適的聚丙烯容器中，放入凝膠，用鋁箔等蓋住容器使染料避光。室溫振蕩染色10-30分鐘，染色時間因凝膠濃度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝膠直接在玻璃平皿上染色，將配好的工作溶液輕輕地倒在膠板上，讓工作液均勻地覆蓋整個膠板，并染色30分鐘。玻璃平皿必須預(yù)先經(jīng)過硅烷化溶液處理（避免染料吸附在玻璃表面上）。
2.4使用藍(lán)光透照儀觀測。藍(lán)光可透過玻璃，觀測聚丙烯酰胺凝膠時，可直接將托有凝膠的玻璃平皿放入藍(lán)光透照儀內(nèi)觀測?？墒褂肊B, SYBR 或GelStar記錄成像系統(tǒng)。
3.Ru Red使用注意事項(xiàng)
3.1在"Ru Red預(yù)染色方法"中，電泳時間不要超過2小時，否則Ru Red會從DNA上分離出來，會產(chǎn)生彌散狀條帶。
3.2在常規(guī)用酒精沉淀核酸的過程中，Ru Red 可以全部從雙鏈核酸上去掉。
3.3如果想對用 Ru Red 染過的膠進(jìn)行 Southern blots，建議在預(yù)雜化和雜化溶液中加入 0.1%- 0.3% 的SDS。
3.4在紫外照射透視下，與雙鏈 DNA 接合的 Ru Red 呈現(xiàn)紅色熒光。
3.5Ru Red對玻璃和非聚丙烯材料具有一定親合力。建議在稀釋、貯存、染色等使用過程中用聚丙烯類容器。
