流式細胞儀系統(tǒng) Novocyte Advanteon配備 1 至 3 個激光器

NovoCyte Advanteon 流式細胞儀建立在大獲成功的 NovoCyte 和 NovoCyte Quanteon 基礎(chǔ)之上。該系統(tǒng)為高要求的科學(xué)家們提供了一套*的功能，而且操作非常簡單。NovoCyte Advanteon 能夠適應(yīng)且日益復(fù)雜的多色流式細胞檢測。該系統(tǒng)可靈活配置 1 至 3 個激光器，并提供最多 21 個熒光通道和 23 個獨立的檢測器。

NovoCyte Advanteon 可針對您的特定需求量身定制，同時可輕松升級以滿足您未來的需求。當(dāng)需要實現(xiàn)高通量檢測時，可以將 NovoSampler Q 集成到不同的實驗室自動化平臺中。這款進樣器可以高效處理 FACS 管（使用 40 管流式管架）和 24、48、96 及 384 孔板。對于 NovoCyte Advanteon 而言，直觀且享譽業(yè)界的 NovoExpress 軟件現(xiàn)在更加*，能夠在數(shù)據(jù)采集、分析和報告方面提供的用戶體驗。

特性

• 更高靈活性，使用 1 至 3 個激光器提供多達 21 種顏色選擇，支持定制和升級
• 樣品回收模式用于在采集結(jié)束時收集未使用的樣品
• 出色的靈敏度和分辨率
• 直觀且強大的軟件，用于數(shù)據(jù)采集、分析和報告
• 智能設(shè)計功能和無人值守操作，可簡化您的工作流程
• 自動化功能，可滿足高通量檢測需求
• 動態(tài)范圍寬達 7.2 個數(shù)量級，無需調(diào)節(jié)增益檢測器電壓
• 高速采集，采集速率高達 100000 事件/秒
• 每個實驗中均能實現(xiàn)準(zhǔn)確的細胞計數(shù)，無需使用參比微球

性能指標(biāo)

工作原理

的光電檢測器

硅光電倍增管 (SiPM) 是基于硅基底的固態(tài)半導(dǎo)體器件，具備光子能級靈敏度，動態(tài)范圍為 7.2 個數(shù)量級，是一款具有光子計數(shù)功能的緊湊檢測器。NovoCyte Advanteon 設(shè)計中的創(chuàng)新光學(xué)器件包含 21 個獨立的 SiPM，可收集并處理來自每個熒光通道的信號。

出色的散射光分辨率，可檢測小顆粒

NovoCyte Advanteon 散射光檢測光學(xué)系統(tǒng)和信號處理電子器件經(jīng)過優(yōu)化，可以分辨粒徑小至 0.1 µm 的顆粒。憑借這種優(yōu)異的分辨率，可輕松識別和分析血小板、細菌和各種亞微米顆粒。

無論流速快慢，結(jié)果保持一致

NovoCyte Advanteon 的流體反饋控制機制可始終確保非常穩(wěn)定的流速。各種樣品流速下均能實現(xiàn)出色的穩(wěn)定性，可在不同的操作條件下提供一致的結(jié)果。如圖所示，與市面上其他系統(tǒng)相比，不同流速下的 CVs 顯著降低。

應(yīng)用

凋亡分析

細胞凋亡也稱為細胞程序性死亡，是細胞調(diào)控自身死亡的過程，通過激活特定通路使細胞發(fā)生收縮、凝聚，并最終通過吞噬作用被清除。這與壞死細胞死亡形成鮮明對比，壞死細胞死亡時細胞失控死亡并裂解，可產(chǎn)生免疫反應(yīng)異常激活等有害影響。因此，凋亡細胞以非常有序的方式死亡，可限制其對周圍細胞和組織的破壞。

多種方法可用于測定細胞死亡并區(qū)分其為凋亡還是壞死。NovoCyte 流式細胞儀具有自動補償設(shè)置和寬熒光檢測動態(tài)范圍，可輕松對分析進行定量，無需調(diào)整 PMT 電壓

免疫表型分析

免疫狀態(tài)與疾病狀態(tài)、治療效率以及對疫苗等外部刺激的反應(yīng)有關(guān)。免疫表型分析可快速識別候選細胞類型、亞類和功能。由于免疫細胞可能影響疫苗的免疫原性及其效能，因此監(jiān)測多種免疫細胞群的頻率以及特定細胞亞群（如單核細胞、NK 細胞、T 細胞和 B 細胞）的分化或活化狀態(tài)至關(guān)重要。NovoCyte 流式細胞儀可同時定量分析多種白細胞，以便更好地了解患者的免疫狀態(tài)并監(jiān)測機體對傳染病的免疫反應(yīng)。

細胞內(nèi)蛋白質(zhì)檢測

對細胞內(nèi)蛋白質(zhì)的檢測和分析有助于細胞亞群和細胞過程的額外表征。為分析非細胞表面蛋白質(zhì)，需要進行細胞固定和破膜。然而，許多磷酸特異性抗體與許多基于去垢劑的常用破膜方法（用于細胞內(nèi)染色）不兼容。在確定磷酸特異性抗體的適宜固定和破膜方法時，需要特別注意。見的方法是用 1.5% 多聚甲醛固定，然后用 99% 甲醇破膜。雖然這種方法適用于多種抗體，但請注意，并非每種磷酸特異性抗體都適用。

此外，在異質(zhì)性樣品中鑒定不同的細胞群，需要對表面蛋白連接的磷酸化蛋白進行染色。必須特別考慮這些表位對固定劑的敏感性，并采取相應(yīng)預(yù)防措施，避免損害表位。因此，樣品在固定前可能需要對特定的表面標(biāo)記物進行染色

細胞周期分析

正常的人體細胞是含有恒定數(shù)量 DNA 的二倍體。在細胞分裂的過程中，DNA 合成導(dǎo)致總 DNA 含量翻倍，隨后在有絲分裂后恢復(fù)正常的 DNA 含量。利用 NovoCyte 流式細胞儀，可以進行詳細的細胞周期分析，了解腫瘤細胞分化、細胞轉(zhuǎn)化以及細胞與化合物之間的相互作用。

圖：在 10 µg/M MG132 或 500 µg/M 5-FU 處理 16 小時后，使用 ACEA NovoCyte 流式細胞儀分析 A549 細胞的細胞周期分布。NovoExpress 內(nèi)置的細胞周期分析模塊中的圖像顯示了處于 G0/G1 期（綠色）、S 期（黃色）和 G2/M 期（藍色）的細胞。與正常未處理的細胞相比，MG132 處理的細胞停滯在 G2/M 期，而 5-FU 處理的細胞停滯在 G0/G1 期。

細胞增殖

細胞增殖是一種重要功能，是高度結(jié)構(gòu)化的事件，如果不受控制，會導(dǎo)致疾病。我們可以通過細胞計數(shù)或使用染料（例如 CFSE）測量增殖。當(dāng) CFSE 標(biāo)記的細胞發(fā)生分裂時，染料在子細胞之間平均分配，隨著染料的不斷稀釋，我們可以測量 CFSE 熒光隨時間的損失。此外，還繪制染料的平均熒光強度 (MFI) 與細胞濃度隨時間的變化曲線，以揭示兩者之間的反比關(guān)系。這類分析方法通常用于觀察 T 淋巴細胞活化的變化。

圖：使用 CFSE 測量 Jurkat T 細胞增殖。A) 使用 CFSE 標(biāo)記 Jurkat T 細胞，并通過 NovoCyte 流式細胞儀分析細胞隨時間的變化，以測定細胞分裂。每個峰值都對應(yīng)于一個單獨的時間點。B) 使用隨細胞分裂產(chǎn)生的信號稀釋，繪制細胞計數(shù)與 CFSE 的平均熒光強度 (MFI) 隨時間的變化曲線。