DNA污染/核酸污染清除劑(DNA-ExitusPlus)
快速幫您解決PCR過程中令人頭痛的DNA污染問題特別適用于PCR室分子生物學試驗的常規(guī)清潔
DNA擴增技術是目前實驗室的技術之一。但是由于在PCR過程中出現(xiàn)的DNA污染卻是令人很頭痛的事情,目前主要有2種方法來預防DNA的污染:
1、通過加入DNA酶或者化學方法修飾降解DNA;
2、通過對DNA堿基進行修飾,保證DNA完整性以阻止DNA聚合酶的序列讀?。蝗欢?jīng)DNA雙鏈斷裂分析結(jié)果顯示,目前市場上的大多數(shù)DNA清除試劑均不能*的降解DNA!針對上述產(chǎn)品的不足,德國AppliChem公司推出了全新的DNA污染/核酸污染清除試劑DNA-ExitusPlus。該試劑在市面已有產(chǎn)品的基礎上做了進一步的改良,能同時對DNA鏈進行雙鏈斷裂和降解。
DNA-ExitusPlus是一種非堿性,沒有腐蝕性,沒有致癌影響的DNA污染去除溶液。它可以使用在實驗室的所有地方。據(jù)的一項測試表明,傳統(tǒng)商業(yè)化的DNA去除劑往往含有有潛在腐蝕性危險的化學成分,包含疊氮化合物、礦物質(zhì)酸如磷酸、鹽酸、刺激性強的過氧化物,堿性物質(zhì)如氫氧化鈉等。德國AppliChem公司的DNA-ExitusPlus則表現(xiàn),沒有對金屬板產(chǎn)生任何損傷。對實驗室其他類型的儀器表面也進行了腐蝕性檢測,DNA-ExitusPlus不會對塑料、橡膠等儀器的表面產(chǎn)生任何損傷。
1、DNA-ExitusPlus DNA污染清除劑特點:
A、可去除實驗室儀器及操作場所表面DNA和RNA的污染;
B、可清潔實驗室內(nèi)PCR工作場所和儀器裝置,防止假性擴增;
C、可用于清潔電泳設備、移液器、離心管、離心柱等裝置;
D、簡單,試劑以可反復使用的噴霧裝置存放并噴灑使用;
E、快捷,只需10分鐘,噴灑后擦拭后即可;
F、高效,采用接觸催化及協(xié)同作用非酶性降解DNA和RNA;
G、安全,所有的組分均可降解,不會殘留在表面對人體和機器造成傷害;
H、無毒,不含有腐蝕性的酸堿物質(zhì)。
2、DNA-ExitusPlus DNA污染清除劑使用方法:
清理實驗室臺面:直接噴灑,反應10-15分鐘后,用無菌水濕紙擦拭后風干即可,無需用無菌水沖洗;
清理實驗室器材:浸濕紙巾后擦拭儀器設備表面,再用干凈的紙巾擦干;對于小型器材設備,直接浸潤后擦干;
清理塑料玻璃設備:通過渦旋將試劑覆蓋到完整設備表面,無菌水沖洗后風干;
清理移液器:按說明拆卸移液器后將軸浸潤到試劑1分鐘,無菌水沖洗后風干。
值得注意的DNA污染清除試新的配方成功減少了指示劑和低濃度的酒精。在試劑的組分中減少酒精的含量,可以很好的改善其活力。
3、DNA-ExitusPlus DNA污染清除劑使用效果驗證:
該試劑在已有產(chǎn)品的基礎上做了進一步的改良,DNA-ExitusPlus能同時對DNA鏈進行雙鏈斷裂和降解。其DNA清除效果非常明顯,當合適的應用于工作區(qū)域時,能*的消除由于非目標DNA導致的擴增。圖一C為未處理對照,X1-X4為傳統(tǒng)商業(yè)化DNA清除試劑,D、D+與D+(10min)為DNA-ExitusPlus系列DNA清除試劑。
圖二為傳統(tǒng)DNA去污劑與DNA-ExitusPlus的潛在腐蝕能力的實驗對照。我們選擇金屬盤做實驗,因為它是實驗材料和儀器的常用材料。將試劑分為10ul等份分別放在不同的金屬盤表面。以無菌水(0)為對照,經(jīng)過20分鐘孵育,將金屬盤擦拭干凈并用無菌水清洗,經(jīng)*的清洗后拍照。X2,X3 和 D為傳統(tǒng)DAN去污劑在不同金屬盤表面引起的腐蝕與損傷,而用經(jīng)DNA- ExitusPlus(D+)處理的金屬盤的表面沒有任何損傷。DNA-ExitusPlus可以在抗腐蝕試驗中顯現(xiàn)出它的特性,在所有的金屬表面的后期處理中沒有損害,沒有腐蝕。在其他塑料制品上做實驗,依舊沒有任何腐蝕。這種試劑可穩(wěn)定儲存12個月并且是耐熱的。
用DNA-ExitusPlus去除DNA污染的在PCR試驗中,將重量為0.1 到1ng的測試DNA的凍干粉放在PCR試管中,在放有凍干DNA樣本中分別加入無菌水和DNAExitusPlus,此后再用100ul的無菌水將PCR管清洗兩次(見圖三)。在PCR反應中,將50ul的混合液加入以上管子,反應的混合物包含的引物,可使對照DNA和測試DNA擴增。對照DNA(1ng)加入到樣本中證明PCR反應沒有被抑制住。擴增得到的DNA帶與所測試DNA是相符的,表明了DNA分子的模板依舊是完整的。在*降解和去除測試DNA以后,PCR反應沒有擴增這條模板任何的片段。陰性對照為加入無菌水的測試DNA模板和對照模板,跑膠后觀察發(fā)現(xiàn),在經(jīng)過DNA-ExitusPlus處理以后的PCR反應,只是擴增出了對照DNA的片段。這表明,DNA- ExitusPlus可清除所有測試DNA模板的痕跡。