檢測原理
將目標抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的目標連接于固相載體上的抗體結(jié)合,然后加入辣根過氧化物酶標記的抗體,將未結(jié)合的抗體洗凈后再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。
反應(yīng)類型 | 雙抗夾心法 |
規(guī)格 | 96T/48T |
中文名稱 | 小鼠酰轉(zhuǎn)移酶KAT7(KAT7)ELISA試劑盒 |
反應(yīng)時間 | 1.5 h |
檢測方法 | 酶聯(lián)免疫吸附測定 |
檢測范圍 | 0.625ng/mL – 20 ng/mL |
靈敏度 | 0.1 ng/mL |
上樣體積 | 50 μL/孔 |
樣本類型 | 血清、血漿、組織、細胞上清或其他生物樣本 |
▎ 特異性
可檢測樣本中的KAT7 , 且與其它類似物無明顯交叉反應(yīng)。
▎ 重復(fù)性
板內(nèi),板間變異系數(shù)均<10%。
▎ 批內(nèi)差
取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續(xù)測定20次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
▎ 批間差
選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本定量測定,每個樣本使用同一試劑盒重復(fù)測定8次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值
精密度
精密度用樣品測定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%)=SD/mean×100 CV<10% Inter-批間差: CV<13%
穩(wěn)定性
經(jīng)測定,試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實驗室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。
▎ 實驗所需自備物品
1、450±10nm濾光片酶標儀(建議儀器使用前預(yù)熱)
2、高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.
3、Eppendorf 移液器.
4、蒸餾水或去離子水.
5、脫脂棉吸水紙.
6、37℃恒溫箱.
7、100ml和1000ml量筒.
小鼠酰轉(zhuǎn)移酶KAT7(KAT7)ELISA試劑盒