產(chǎn)品簡介
江苑生物研發(fā)的高敏ECL化學發(fā)光檢測試劑盒用是免疫印跡實驗中與辣根過氧化物酶(HRP)配套使用的的高靈敏增強型檢測試劑盒。該產(chǎn)品基于新一代增強型化學發(fā)光底物研制而成,在HRP的催化下發(fā)生化學反應而發(fā)光,可用于檢測固定在膜上的蛋白質(zhì)等生物大分子。其高靈敏度能夠檢測皮克級別的抗原,發(fā)光信號強烈持久,可以使用X-光膠片曝光或者化學發(fā)光成像儀進行檢測。
江苑生物生產(chǎn)的ECL化學發(fā)光檢測試劑盒有兩種,常規(guī)的Western檢測,例如豐富度較高的目的蛋白檢測,優(yōu)先推薦使用高敏ECL化學發(fā)光檢測試劑盒(JY01054/JY01055/JY01056)。對于低豐度較難檢測的目的蛋白,優(yōu)先推薦使用檢測靈敏度更高的超敏ECL化學發(fā)光檢測試劑盒(JY01051/JY01052/JY01053)。
保存條件
4 ℃保存,1年有效。
注意事項
1.試劑盒中的A液和B液在吸取過程中必須要更換吸頭,兩者相互污染后會逐漸失效,影響后續(xù)效果。試劑盒使用后,需擰緊瓶蓋,尤其是B液,具有氧化劑,容易被還原失效。
2.如果曝光后背景很深,可能原因有二抗?jié)舛冗^高,或一抗?jié)舛冗^高,或者封閉液不合適,換用其他封閉液。
3.如果熒光迅速淬滅,可能原因是目的條帶熒光過強,導致HRP迅速消耗ECL。
4.轉(zhuǎn)膜、封閉、孵育都需要避免氣泡,另外戴手套可以避免在膜上留下手印,保持膜的干凈。
5.金屬氧化物顆??赡軙斐赡ど铣霈F(xiàn)顆粒狀斑點,避免使用帶有銹跡的剪刀以及鑷子,建議使用塑料的平頭鑷子。
6.應使用高質(zhì)量保鮮膜。質(zhì)量較差的保鮮膜可能會淬滅熒光或由于含有雜質(zhì)而污染印跡膜造成曝光背景值偏高。
7.避免將多張膜置于同一個洗膜盒內(nèi)洗膜,相互吸附或摩擦可能造成很深的背景。
8.本產(chǎn)品僅用于科學研究,不得存放于普通住宅內(nèi)。
9.操作時請穿實驗服,佩戴一次性手套。
使用說明
1. 執(zhí)行常規(guī)電泳、轉(zhuǎn)膜、HRP標記抗體或者HRP標記核酸探針孵育、洗膜。
2. 最后1次洗膜的同時,新鮮配制發(fā)光工作液(推薦100-200 μL發(fā)光液/cm2膜):分別取等體積的A液和B液,混勻備用。
3. 用平頭鑷取出膜,搭在濾紙上瀝干洗液,勿使膜*干燥。用移液器將工作液加到膜上,使之充分接觸。室溫孵育1-2 min,準備立即壓片曝光。
4. 用平頭鑷子夾起膜,膜的下緣輕輕接觸吸水紙,去除膜上多余的液體,留下少量工作液,不可讓膜*干燥。
5. 在X光膠片暗盒內(nèi)表面鋪一張面積大于膜的保鮮膜。將印跡膜貼在保鮮膜上,將保鮮膜折起來*包裹印跡膜,去除氣泡和皺褶,可剪去邊緣部多余的保鮮膜。用濾紙吸去多余的發(fā)光工作液。用膠帶將覆蓋印跡膜的保鮮膜固定在暗盒內(nèi),蛋白帶面向上。
6. 暗房內(nèi)取一張X光膠片至于包裹的膜上,壓片,曝光30 sec-2 min,顯影定影沖洗。
高敏型ECL化學發(fā)光檢測試劑盒 WB顯影液
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