028381 卵黃多粘菌素瓊脂平板(MYP)
(Mannitol Yolk Polymyxin Agar plate)
用 途：
卵黃多粘菌素瓊脂平板用于蠟樣芽孢桿菌的菌數(shù)測定及分離培養(yǎng)(GB/T4789.28-2003中4.64，GB/T4789.14-2003，SN0176-92和SN/T2206.2-2009，ISO標準)。
原 理：
蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、維生素和生長因子;D—為可發(fā)酵糖類;氯化鈉維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;酚紅為pH指示劑;卵黃含有，蠟樣芽孢桿菌產(chǎn)生酶，在菌落周圍產(chǎn)生沉淀環(huán);并發(fā)酵D—產(chǎn)酸使菌落顯黃色;可抑制雜菌的生長。
培養(yǎng)基配方(每升)：
蛋白胨 10g
牛肉膏粉 1g
D— 10g
氯化鈉 10g
瓊脂 15g
酚紅 0.025g
最終pH7.4±0.2
使用方法： (平板計數(shù)法)
1、樣品的制備。
以無菌操作將檢樣25g(mL)用滅菌生理鹽水或磷酸鹽緩沖液做成10-1—10-5的稀釋液。
2、取各稀釋液0.1mL接種到MYP瓊脂平板上，用滅菌L形玻璃棒均勻涂布于整個瓊脂表面。每稀釋度接種兩個MYP瓊脂平板。
3、將平板置于36±1℃培養(yǎng)12-20h。
4、選取適當菌落的平板進行計數(shù)。并計算同一稀釋度兩個平板的平均菌落數(shù)。
蠟樣芽孢桿菌在MYP平板上生成的菌落為粉紅色，環(huán)繞產(chǎn)生酶沉淀環(huán)。如反應不典型，可繼續(xù)培養(yǎng)24h再計數(shù)。
5、計數(shù)后從每個平板上選取5個已計數(shù)的菌落，按有關操作進行證實實驗。
6、根據(jù)證實實驗確定為蠟樣芽孢桿菌的菌落數(shù)，按比例計算出該皿內(nèi)的蠟樣芽孢桿菌菌落數(shù)，然后乘其稀釋倍數(shù)，即得每克(或mL)樣品所含蠟樣芽孢桿菌數(shù)。例如MYP平板的可疑菌落為25個，取5個鑒定，證實為4個，乘上稀釋倍數(shù)(如10-4)，再乘上1 g(或mL)檢樣數(shù)(取的是0.1mL樣)則為：
25×4/5×10-4×10=2×106
質(zhì)量控制：
質(zhì)控菌株接種后于36±1℃培養(yǎng)24h，結果如下。
貯 存：貯存于4-8℃。貯存期三個月。
規(guī) 格：20個/盒
參考文獻:
1. GB/T 4789.14-2003 中華人民共和國國家標準 食品衛(wèi)生微生物學檢驗 蠟樣芽孢桿菌
2. GB/T 4789.28-2003 中華人民共和國國家標準 食品衛(wèi)生微生物學檢驗 染色法,培養(yǎng)基和試劑
3. SN 0176-92 中華人民共和國進出口商品檢驗行業(yè)標準 出口食品中蠟樣芽孢桿菌檢驗方法
4. SN/T2206.2-2009 中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標準 化妝品微生物檢驗方法 第2部分：需氧芽孢桿菌和蠟樣芽孢桿菌
5. ISO7932：2004 Microbiology of food and animal feeding stuffs-----Horizontal method for the enumeration of presumptive Bacillus cereus-----Colony-count technique at 30℃
