MycoLight Green JJ98核酸染料是美國(guó)AAT Bioquest生產(chǎn)的核酸染料,MycoLight 綠色JJ98染色是一種優(yōu)秀的綠色熒光核和染色體復(fù)染劑,對(duì)原核細(xì)胞和真核細(xì)胞膜均具有滲透性。MycoLight Green JJ98染料對(duì)DNA具有高親和力,并且在與488 nm氬激光線的激發(fā)值和~500 nm處的熒光發(fā)射值結(jié)合時(shí)顯示出增強(qiáng)的熒光。MycoLight Green JJ98染色劑特別適用于細(xì)菌檢測(cè)的核復(fù)染劑,因?yàn)樗梢匀旧畹暮退赖母锾m氏陽性菌和革蘭氏陰性菌。它是STYO®9(STYO®是Invitrogen的商標(biāo))的替代品。百螢生物是AAT Bioquest的中國(guó)代理商,為您提供的MycoLight Green JJ98核酸染料。
適用儀器
流式細(xì)胞儀 | |
Ex: | 488 nm |
Em: | 530/30 nm |
通道: | FITC通道 |
熒光顯微鏡 | |
Ex: | FITC 濾波片組 |
Em: | FITC 濾波片組 |
推薦孔板: | 黑色透明底板 |
樣品實(shí)驗(yàn)方案
操作步驟
以下協(xié)議適用于大多數(shù)細(xì)胞類型。這些條件需要調(diào)整每種細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)。生長(zhǎng)培養(yǎng)基,細(xì)胞密度,其他細(xì)胞類型和因子的存在可能影響染色。玻璃器皿上的殘留洗滌劑也可能影響許多生物的染色,并導(dǎo)致在有或沒有細(xì)胞存在的溶液中出現(xiàn)明亮染色的物質(zhì)。
稀釋MycoLight Green JJ98和JJ99時(shí)使用塑料管,因?yàn)橄♂尩奈蹪n粘附在玻璃上。通常,在不含磷酸鹽的緩沖液中獲得佳結(jié)果。
1.培養(yǎng)物中的貼壁細(xì)胞可以在蓋玻片上原位染色。通過離心和懸浮液沉淀細(xì)胞重懸于緩沖鹽溶液或水中。
2.用非磷酸鹽緩沖液(如Hepes緩沖液或您選擇的緩沖液)稀釋MycoLight Green JJ98或JJ99。添加MycoLight Green JJ98。使用下表1中列出的濃度作為指導(dǎo)。在的實(shí)驗(yàn)中,在整個(gè)建議范圍內(nèi)嘗試幾種染料濃度,以確定產(chǎn)生染色的濃度。
表格1 用MycoLight Green JJ98染色細(xì)胞的建議條件
適用 | 溶度 | 染色條件 |
細(xì)菌細(xì)胞 | 50 nM - 20μM | 渦旋混合,然后孵育1-30分鐘。 |
真核細(xì)胞 | 10 nM - 5μM | 孵育10-120分鐘。 |
微孔板 | TE緩沖液中50nM | 孵育5分鐘,沖洗干凈。 |
3.染色的真核細(xì)胞通常顯示彌漫性細(xì)胞質(zhì)染色以及核染色。 特別是經(jīng)常觀察到MycoLight Green JJ98和JJ99對(duì)核內(nèi)體的強(qiáng)烈熒光染色。