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mFluor Violet 540 酸 熒光染料 染色液

參考價面議
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱西安百螢生物科技有限公司
  • 品       牌其他品牌
  • 型       號1142
  • 所  在  地西安市
  • 廠商性質(zhì)代理商
  • 更新時間2024/1/30 15:28:41
  • 訪問次數(shù)159
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西安百螢生物科技有限公司是一家專注從事生物、化學(xué)試劑及其試劑盒;主要以熒光探針,分子探針,核酸/蛋白質(zhì)標(biāo)記、細(xì)胞檢測等技術(shù)和產(chǎn)品為研發(fā)核心,產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于基因合成、細(xì)胞檢測、活體示蹤,抗體標(biāo)記、新藥篩選等領(lǐng)域。

美國AAT Bioquest公司。長年以來百螢生物與AAT Bioquest互補優(yōu)勢,為國內(nèi)外廣大用戶提供光譜檢測,底物顯色,熒光發(fā)光技術(shù)等全系列解決方案。近年來,百螢生物已與多家藥企、CRO公司、眾多高校及科研單位建立了長期穩(wěn)定的合作關(guān)系;我們的服務(wù)宗旨:不斷創(chuàng)新,為廣大科研用戶提供服務(wù);主要分為以下幾個產(chǎn)品線:

  1. 開發(fā)和生產(chǎn)熒光標(biāo)記探針和發(fā)光探針。這些熒光標(biāo)記探針和發(fā)光探針是用于標(biāo)記生物大分子例如,蛋白質(zhì),核酸,碳水化合物的主要工具;

  2. 檢測蛋白質(zhì),核酸和活細(xì)胞熒光和熒光探針;

  3. 新型各種酶活性熒光探針和發(fā)光探針(特別是用與研究蛋白酶,蛋白激酶和氧化還原酶熒光標(biāo)記探針和發(fā)光探針);

  4. 開發(fā)用于分子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)研究試劑和試劑盒;

  5. 生物鈣膜電位探針和神經(jīng)生物學(xué)熒光標(biāo)記探針和發(fā)光探針;











開發(fā)和生產(chǎn)熒光標(biāo)記探針和發(fā)光探針。這些熒光標(biāo)記探針和發(fā)光探針是用于標(biāo)記生物大分子例如,蛋白質(zhì),核酸,碳水化合物的主要工具;檢測蛋白質(zhì),核酸和活細(xì)胞熒光和熒光探針; 新型各種酶活性熒光探針和發(fā)光探針(特別是用與研究蛋白酶,蛋白激酶和氧化還原酶熒光標(biāo)記探針和發(fā)光探針);開發(fā)用于分子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)研究試劑和試劑盒;生物鈣膜電位探針和神經(jīng)生物學(xué)熒光標(biāo)記探針和發(fā)光探針
Ex?(nm) 402 Em?(nm) 535
分子量 ~1600 溶劑 DMSO
儲存條件 在零下15度以下保存,?避免光照
mFluor Violet 540 酸 熒光染料AAT Bioquest的mFluor 染料專為針對多色流式細(xì)胞儀的應(yīng)用而開發(fā)。 這些染料具有較大的斯托克斯位移,并且可以被流式細(xì)胞儀的激光線(例如405nm,488nm和633nm)很好地激發(fā)。
mFluor Violet 540 酸 熒光染料 染色液 產(chǎn)品信息

   mFluor Violet 540 酸 熒光染料是美國AAT Bioquest生產(chǎn)的mFluor系列。AAT Bioquest的mFluor 染料專為針對多色流式細(xì)胞儀的應(yīng)用而開發(fā)。 這些染料具有較大的斯托克斯位移,并且可以被流式細(xì)胞儀的激光線(例如405nm,488nm和633nm)很好地激發(fā)。該染料的熒光激發(fā)和發(fā)射值分別為?405 nm和?540 nm。 這些光譜特性使其成為Pacific Orange 標(biāo)記染料的替代品。 是穩(wěn)定的,并且是制備各種mFluor Violet 540衍生物的常見前體。百螢生物為您提供優(yōu)質(zhì)的mFluor Violet 540 酸 熒光染料

實驗方案

操作方法

注意:該標(biāo)記方案是針對山羊抗小鼠IgG與mFluor 450 SE的綴合物開發(fā)的。 您需根據(jù)您的實際情況而定。

1.準(zhǔn)備蛋白質(zhì)儲備溶液(溶液A):

將100μL反應(yīng)緩沖液(如1 M碳酸鈉溶液或1 M磷酸鹽緩沖液,pH~9.0)與900μL目標(biāo)蛋白溶液(如抗體,蛋白質(zhì)濃度> 2 mg / ml)混合至100μL,以得到1 mL蛋白質(zhì)標(biāo)記原液。

注1:蛋白質(zhì)溶液(溶液A)的pH值應(yīng)為8.5±0.5。如果蛋白質(zhì)溶液的pH低于8.0,則使用1M碳酸*鈉溶液或1M pH 9.0磷酸鹽緩沖液將pH調(diào)節(jié)至8.0-9.0的范圍。

注2:蛋白質(zhì)應(yīng)溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)中。如果蛋白質(zhì)溶解在Tris或甘*酸緩沖液中,則必須用pH7.2-7.4的1X PBS透析,以除去用于蛋白質(zhì)沉淀的游離胺或銨鹽(例如硫酸銨和乙酸銨)。

注3:不純的抗體、穩(wěn)定的牛血清蛋白(BSA)抗體或明膠不會被很好的標(biāo)記,疊*化鈉或硫柳汞的存在也可能干擾綴合反應(yīng)??梢酝ㄟ^透析或旋轉(zhuǎn)柱除去疊*化鈉或硫柳汞,以獲得標(biāo)記結(jié)果。

注4:如果蛋白質(zhì)濃度低于2 mg / mL,則結(jié)合效率會顯著降低。為獲得標(biāo)記效率,建議蛋白質(zhì)濃度范圍為2-10 mg / mL。

2.準(zhǔn)備染料儲備溶液(溶液B):

將無水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制備10-20mM儲備溶液。 通過移液或渦旋混合均勻。

注意:在開始綴合前準(zhǔn)備染料儲備溶液(溶液B),及時使用。 染料儲備溶液的長期儲存可降低染料活性。 溶液B可在冰箱中保存兩周,避光保存。 避免凍融循環(huán)。

3.確定染料/蛋白質(zhì)比例(可選):

注意:每種蛋白質(zhì)都需要不同的染料/蛋白質(zhì)比例,這也取決于染料的性質(zhì)。蛋白質(zhì)的過度標(biāo)記可能影響其結(jié)合親和力,而低染料/蛋白質(zhì)比率的蛋白質(zhì)綴合物會降低靈敏度。我們建議您通過使用連續(xù)不同量的標(biāo)記染料溶液重復(fù)步驟4和5來實驗確定染料/蛋白質(zhì)比率。通常,對于大多數(shù)染料 - 蛋白質(zhì)綴合物,推薦使用4-6種染料/蛋白質(zhì)。

3.1使用10:1摩爾比的溶液B(染料)/溶液A(蛋白質(zhì))作為起始點:將5μl染料儲備溶液(溶液B,假設(shè)染料儲備溶液為10 mM)加入到樣品瓶中。蛋白質(zhì)溶液(95μl溶液A)有效搖動。假設(shè)蛋白質(zhì)濃度為10mg / mL并且蛋白質(zhì)的分子量為~200KD,蛋白質(zhì)的濃度為~0.05mM。

注意:蛋白質(zhì)溶液中DMSO的濃度應(yīng)<10%。

3.2運行綴合反應(yīng)(參見下面的步驟4)。

3.3重復(fù)#3.2,溶液B /溶液A的摩爾比為5:1;分別為15:1和20:1。

3.4使用預(yù)制的旋轉(zhuǎn)柱純化所需的綴合物。

3.5計算上述4種結(jié)合物的染料/蛋白質(zhì)比(DOS)。

3.6檢測上述4種結(jié)合物,確定染料/蛋白質(zhì)比例,以擴大標(biāo)記反應(yīng)。

4.運行結(jié)合反應(yīng):

4.1有效加入適量的染料儲備溶液(溶液B)到蛋白質(zhì)溶液(溶液A)的小瓶中晃動。

注意:溶液B /溶液的摩爾比由步驟3.6確定。如果跳過步驟3,我們建議使用10:1溶液B(染料)/溶液A(蛋白質(zhì))的摩爾比。

4.2繼續(xù)在室溫下旋轉(zhuǎn)或搖動反應(yīng)混合物30-60分鐘。

5.純化綴合物

以下方案是使用Sephadex G-25柱純化染料 - 蛋白質(zhì)綴合物的實例。

5.1按照說明書準(zhǔn)備Sephadex G-25色譜柱。

5.2將反應(yīng)混合物(直接從步驟4)加載到Sephadex G-25柱的頂部。

5.3樣品在頂部樹脂表面下方運行時立即加入PBS(pH 7.2-7.4)。

5.4向所需樣品中加入更多PBS(pH 7.2-7.4)以完成色譜柱純化。

注1:立即使用時,染料 - 蛋白質(zhì)偶聯(lián)物需要用染色緩沖液稀釋,并等分多次使用。

注2:對于長期儲存,染料 - 蛋白質(zhì)綴合物溶液需要濃縮或冷凍干燥。






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