免疫熒光技術的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
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英文名稱 Anti-CEP104
中文名稱 CEP104抗體
別 名 CE104_HUMAN; Centrosomal protein of 104 kDa; Cep104; GlyBP; Glycine Binding Protein; glycine-, glutamate- and thienylcyclohexylpiperidine-binding protein; KIAA0562; LOC246295.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領域 腫瘤 細胞生物 神經(jīng)生物學 信號轉(zhuǎn)導
蛋白分子量 predicted molecular weight: 104kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CEP104 (265-540aa)
亞 型 IgG
免疫熒光技術的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
實驗步驟:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,10min后棄去,使標本保持一定濕度。
② 滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間(參考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不時振蕩。
④ 取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
⑤ 立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度,一般可用“+”表示:
(-)無熒光;(±)極弱的可疑熒光;(+)熒光較弱,但清楚可見;(++)熒光明亮;(+++ --++++)熒光閃亮。待檢標本特異性熒光染色強度達“++”以上,而各種對照顯示為(±)或(-),即可判定為陽性。
雞絲氨蛋白酶1(PRSS1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒1,5-萘二磺,四水犁黑輪斑交鏈孢霉拉丁屬名: Meyerozyma guilliermondii
雞無孢蛋白(ASPN)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒1,5-萘二磺,四水季也蒙邁耶氏酵母拉丁屬名: jejuni
雞水通道蛋白2(AQP-2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 1,5-萘二磺,四水空腸彎曲桿菌拉丁屬名: Aspergillus usamii
雞P選擇素(SELP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒脒硫脲宇佐美曲霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
雞α橫紋肌肌動蛋白(α-SCA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒脒硫脲貝氏葡萄座腔菌拉丁屬名: Pseudomonas pseudoalcaligenes
雞磷脂酶B(PLB)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒脒硫脲類產(chǎn)假單胞菌拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
雞唾液結(jié)合免疫球蛋白樣凝集素12(SIGLEC12)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Dalcetrapib釀酒酵母拉丁屬名: Lysobacter spongiicola
雞神經(jīng)型一氧化氮合酶(NOS1/nNOS)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒WHI-P154居海綿溶桿菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
雞胰高血糖素(GC)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 L-谷氨-15N毛柄金錢菌(金針菇)拉丁屬名: Streptomyces flavospinosporus
雞組織蛋白酶K(CTSK)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 L-谷氨-15N黃色孢鏈霉菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
雞V型膠原α2(COL5α2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 FMOC-L-3-氨總狀共頭霉拉丁屬名: Streptomyces anulatus
雞可溶性腺苷環(huán)化酶(sAC)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒FMOC-L-3-氨環(huán)圈鏈霉菌拉丁屬名: Penicillium resedanum McLennan
雞凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX-1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒FMOC-L-2-氨木犀青霉拉丁屬名: Staphylococcus sp.
雞白介素1α(IL-1α)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒異噁唑-5-葡萄球菌屬拉丁屬名: Pseudomonas syringae
雞α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒異噁唑-5-丁香假單胞菌拉丁屬名: Streptomyces malaysiensis
雞11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 異噁唑-5-馬來西亞鏈霉菌拉丁屬名: Sanghuangporus baumii
CEP104抗體雞淋巴功能相關抗原2(LFA-2/CD2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-CD158e/KIR3DL1/FITC 熒光素標記NK抑制性受體3DL1抗體IgG
雞嗜鉻蛋白B(CgB)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-CD158e/KIR3DL1/FITC 熒光素標記NK抑制性受體3DL1抗體IgG
雞胎盤堿性磷酸酶(PLAP/ALPP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-CD158i/KIR2DS4/FITC 熒光素標記NK抑制性受體2DS4抗體IgG
雞Apelin 36(AP36)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-CD147/EMMPRIN/FITC 熒光素標記外質(zhì)金屬蛋白酶誘導因子抗體IgG
雞蕈堿型乙酰膽堿受體亞型M2(M-AChRM2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-CD151/MER2/PETA-3/FITC 熒光素標記CD151抗體IgG
雞免疫球蛋白G3(IgG3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-CD155/PVR/FITC 熒光素標記CD155抗體IgG
雞TATA框結(jié)合蛋白/TBP相關因子(TAF)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-CD160/By55/FITC 熒光素標記NK受體BY55抗體IgG
雞GATA結(jié)合蛋白1(GATA1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-CD161/NK1.1/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠CD161抗體IgG