免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
公司抗體僅用于科研現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時(shí)我司為您提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!
英文名稱 Anti-Phospho-cdc25C (Thr48)
中文名稱 磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25C抗體價(jià)格
別 名 CDC 25; Cdc 25C; CDC25; Cell division cycle 25 homolog C; Cell division cycle 25C; Cell division cycle 25C protein; Dual specificity phosphatase Cdc25C; M phase inducer phosphatase 3; Mitosis inducer CDC25; MPIP3; Phosphotyrosine phosphatase.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat
產(chǎn)品類型 一抗 磷酸化抗體
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞周期蛋白 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 53kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human cdc25C around the phosphorylation site of Thr48
亞 型 IgG
免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
實(shí)驗(yàn)步驟:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,10min后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
② 滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間(參考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不時(shí)振蕩。
④ 取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
⑤ 立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度,一般可用“+”表示:
(-)無熒光;(±)極弱的可疑熒光;(+)熒光較弱,但清楚可見;(++)熒光明亮;(+++ --++++)熒光閃亮。待檢標(biāo)本特異性熒光染色強(qiáng)度達(dá)“++”以上,而各種對照顯示為(±)或(-),即可判定為陽性。
兔質(zhì)金屬蛋白酶17(MMP-17)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒3-(三硅炔)噻吩屎腸球菌拉丁屬名: Bacillus pumilus
兔異常凝血酶原(APT)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 吡喃葡糖蔗糖短小芽孢桿菌 更名不慌供應(yīng)拉丁屬名: Hainesia lythri
兔生長分化因子2(GDF2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒4'-(4-氧苯)-2,2':6',2''-三吡啶絨邊膠盤孢拉丁屬名: Phomopsis longicolla Hobbs
兔III型前膠原氨端原肽(PIIINP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒氧化鍺大豆擬莖點(diǎn)種腐病菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
兔腺苷脫氨酶(ADA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 蒽醌-2-磺鈉鹽杏鮑菇拉丁屬名: Pleurotus pulmonarius
兔生長調(diào)節(jié)致癌因α(GROα/CXCL1/NAP3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 蒽醌-2-磺鈉鹽肺形側(cè)耳拉丁屬名: Escherichia coli
兔肝素因子4抗體(HPF4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒蒽醌-2-磺鈉鹽大腸埃希氏菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
兔血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 氫氧化鍶 八水合物枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
兔α-黑色素激素(αMSH)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 氫氧化鍶 八水合物枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Rhodotorula minuta
兔誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(NOS2/iNOS)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒氫氧化鍶 八水合物小紅酵母拉丁屬名: Bacillus subtilis
兔α2抗纖溶酶(α2-AP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 2,6-二氨蒽醌枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Arthrobacter globiformis
兔質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒鄰苯二二酯球形節(jié)桿菌用途: 醬油生產(chǎn)菌
兔原鈣黏素15(PCDH15)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 鄰苯二二酯米曲霉拉丁屬名: Staphylococcus caprae
兔瘦素(LEP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒5-硝-2-山羊葡萄球菌拉丁屬名: Candida krusei
兔ADAM金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白1元4(ADAMTS4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 5-硝-2-克魯斯假絲酵母拉丁屬名: Aspergillus awamori
兔Dickkopf 相關(guān)蛋白2(DKK2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 5-硝-2-泡盛曲霉拉丁屬名: Hymenobacter sp.
磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25C抗體價(jià)格兔乙酰膽堿受體抗體(AChRab)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human arabinogalactan proteins,AGPs ELISA Kit 人阿拉伯半乳糖蛋白
兔紅膜蛋白(EMP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human Beta Lactoglobulin, Beta-Lg ELISA Kit 人β乳球蛋白
兔巨噬集落激因子受體(MCSFR)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human Beta catenin, Beta-Cat ELISA Kit 人β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白
兔V-Myc骨髓瘤病癌因同源物(MYC)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human Beta amyloid precursor protein, BetaAPP ELISA Kit 人淀粉樣前體蛋白
兔信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子5A(STAT5A)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human beta2 glycoprotein, Beta2-GP ELISA Kit 人β2糖蛋白
兔白介素3介導(dǎo)核因子(NFIL3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human Alpha Lactalbumin, Alpha-La ELISA Kit 人α乳清蛋白
兔τ-蛋白激酶1(τPK1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKP ELISA Kit 人N-乙酰-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸
兔神經(jīng)絲蛋白3(NEF3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human Lactoferrin,LTF/LF ELISA kit 人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白