商品介紹:
測定意義 測定意義: 酒是含酒精(乙醇)飲料的統(tǒng)稱,乙醇是酒的主要成分,是衡量酒質(zhì)量的重要指標之一。我國是早發(fā)明釀酒的國家,也是酒類產(chǎn)品消費大國,其消費量居世界。因此,快速、準確測定酒中乙醇含量,對于確保酒的質(zhì)量和保護消費者的健康具有重大意義。 測定原理: 乙醇在乙醇脫氫酶的催化下氧化脫氫生成乙醛,同時,NAD被還原生成NADH,NADH在1-mPMS的作用下使WST-8顯橙黃色,通過450 nm下測定吸光值變化可測得乙醇含量。 需自備的儀器和用品: 酶標儀、臺式離心機、可調(diào)式移液器、96孔板、研缽、冰、蒸餾水。 |
試劑組成和配制:
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
乙醇含量測試盒微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | BK-01S6339 |
實驗結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。
操作步驟:
1. 樣品的準備:
a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
血瓊脂基礎(chǔ)2號 Blood Agar Base N0.2 250g
1瓶 LA795(上皮樣)細胞株 LA795(上皮樣) 低溫運輸和保存
醇麥康凱瓊脂基礎(chǔ)(SMAC) Sorbitol Maconkey Agar Base 250g
1g 原 Chymotrypsinogen 4℃保存
250mL Stripping Buffer 2,4X Stripping Buffer 2,4X 常溫保存
50次 動物線粒體總蛋白提取劑盒
2 ug pSIREN-Retro Q pSIREN-Retro Q 低溫運輸,-20℃保存
25次 磁珠法mRNA提取試劑盒
2 ug pCMV-SPORT6 DNAJC7 pCMV-SPORT6 DNAJC7 低溫運輸,-20℃保存
改良Camp-BAP氏瓊脂添加劑A Modified Camp-BAP Agar additive A 1ml*5
1g 硫酸鹽 Protamine Sulfate Salt 室溫干燥保存
乙醇含量測試盒微量法Nogo-B/A 軸索過度生抑制因子-B/A抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-PDPK1(Ser410) 磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激1抗體 規(guī)格: 0.1ml
FAM160B1 FAM160B1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlOtoraplin/OTOR/Fibrocyte derived protein 纖維細胞源性蛋白 規(guī)格: 0.2ml
Adenylate kinase 2/AK2 苷酸激1抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-FoxO1 (Ser256) 磷酸化叉蛋白家族1抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-ATF2(Ser322) 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-CRMP2 (Thr514+Ser518) 磷酸化二嘧啶樣2抗體 規(guī)格: 0.1ml
GLCCI1 糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlTPH2 5色羥化2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Microsporidia protien 蜜蜂微孢子蟲蛋白抗體 規(guī)格: 1mlWASF2 WASF2抗體 規(guī)格: 0.2ml
PH-4/P4H-TM 脯水解4抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-CaMKII (Thr286) 磷酸化鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激2α抗體 規(guī)格: 0.1ml
COPS4 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基4抗體 規(guī)格: 0.2mlDonkey anti-Goat IgG whole serum 驢抗羊IgG抗清 規(guī)格: 1ml
VPS4a 液泡分選蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2mlC9ORF46 9號染色體開放閱讀框46抗體 規(guī)格: 0.2ml
JNK1/2/3 氨基末端激1/2/3抗體 規(guī)格: 0.1mlMARCH2 膜相關(guān)環(huán)指蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml
PAX4 配對盒同源基因4抗體 規(guī)格: 0.1mlABHD14B 水解結(jié)構(gòu)域蛋白14B抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-horse IgG/Gold 膠體金標記的兔抗馬IgG 規(guī)格: 0.5mlVAV3 核苷酸交換因子VAV3抗體 規(guī)格: 0.2ml