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NADP蘋果酸脫氫酶(NADPMDH)測試盒微量法

參考價面議
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱上海帛科生物技術(shù)有限公司
  • 品       牌其他品牌
  • 型       號
  • 所  在  地上海市
  • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
  • 更新時間2023/12/29 16:08:00
  • 訪問次數(shù)853
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上海帛科生物技術(shù)有限公司(Shanghai boke Biotechnology Co. , Ltd. )專業(yè)經(jīng)營生物領(lǐng)域試劑、抗體、

儀器耗材和各類進(jìn)口品牌生物試劑。合作于多家企業(yè)實驗室,提供生物試劑、免疫試劑、生化試劑、實驗儀器及耗材、

制藥工業(yè)及原料、細(xì)胞培養(yǎng)試劑和科研診斷等各類科研產(chǎn)品,供應(yīng)于生命科學(xué)基礎(chǔ)開發(fā)研究、疾病診斷與制藥、生物技術(shù)、

衛(wèi)生與健康等諸多領(lǐng)域。公司產(chǎn)品種類齊全,質(zhì)量保障,歡迎新老客戶惠顧!




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貨號 BK-01S6329
幽門螺旋桿菌染色液公司其它產(chǎn)品IL17A Protein Canine 重組狗 IL17 / IL17A 蛋白*質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Olanzapine
人神經(jīng)細(xì)胞(HN) (10×106 ) 小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(EGFP標(biāo)記) MGC80-3(MGC-803)人胃癌細(xì)胞*(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
NADP蘋果酸脫氫酶(NADPMDH)測試盒微量法 產(chǎn)品信息

實驗結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

NADP蘋果酸脫氫酶(NADPMDH)測試盒微量法

100管/96樣

微量法

BK-01S6329

商品介紹:

測定意義

測定意義:

MDH EC 1.1.1.37)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,線粒體中MDHTCA循環(huán)的關(guān)鍵酶之一,催化蘋果酸形成草酰乙酸;相反,胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物, 連接多條重要的代謝途徑。因此,MDH在細(xì)胞多種生理活動中扮演著重要的角色,包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的輔酶特異性,MDH分為NAD-依賴的MDHNADP-依賴的MDH, NADP-MDH主要存在于真核細(xì)胞中。

測定原理:

NADP-MDH催化NADPH還原草酰乙酸生成蘋果酸,導(dǎo)致340nm處光吸收下降。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
11.png

操作步驟:

1. 樣品的準(zhǔn)備:

a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。

2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

2 ug pEE12 pEE12 低溫運輸,-20℃保存

小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌成套生化鑒定管  10種*2套/盒*5盒

25g 牛膽酸鈉 Taurocholic Acid Sodium Salt 室溫干燥保存

50T 玉米T25 PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

500次 阿爾瑪藍(lán)細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒檢測試劑 Alamar Blue Cell Proliferation And Cytotoxicity  -20℃避光保存

100mL HEPPSO Buffer,0.2M,pH8.5  HEPPSO Buffer,0.2M,pH8.5  常溫保存

100次 免RNA提取RT-PCR試劑盒  Cell Lysate RT-PCR Mix -20℃保存

1000mL Citrate Buffered Saline or SSC,20X,pH7.0 Citrate Buffered Saline or SSC,20X,pH7.0 常溫保存

有機(jī)磷細(xì)菌培養(yǎng)基 Bacterial organophosphorus Medium 250g

1瓶 NCI-H205細(xì)胞株 NCI-H205 低溫運輸和保存

去氧膽酸鹽枸櫞酸鹽乳糖蔗糖瓊脂 DCLS Agar 250g

NADP蘋果酸脫氫酶(NADPMDH)測試盒微量法Rabbit Anti-pig IgG/Bio  標(biāo)記的兔抗豬IgG 規(guī)格: 0.1ml

Aurora A/B/C  有絲分裂激A/B/C抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-SHC(Ser36)  磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-MAPKAPK5(Thr182)  磷酸化p38調(diào)節(jié)/激活蛋白激抗體 規(guī)格: 0.1ml

NRSF/REST  神經(jīng)元抑制蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

Mouse Anti-Guinea pig IgG/AP  堿性磷酸(AP)標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

NRIP  雄激素受體復(fù)合物相關(guān)蛋白抗體(核受體相互作用蛋白) 規(guī)格: 0.2ml

LAMR1(CT)  層粘連蛋白受體1抗體(C端) 規(guī)格: 0.2ml

FOXO1 + FOXO3 + FOXO4  叉蛋白O1/O3/O4抗體 規(guī)格: 0.2ml

Ret/HSCR1  原基因酪蛋白激受體RET/多發(fā)性內(nèi)分泌瘤和甲狀髓樣蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlTAGL2/TAGLN2  細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白2抗體 0.2ml

FADS1  脂肪酸去飽和1抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-MAPK14(Thr180)  磷酸化p38MAPK抗體 規(guī)格: 0.1ml

CD158i  NK細(xì)胞抑制性受體2DS4抗體 規(guī)格: 0.2mlARSK  芳香基硫酸酯K抗體 規(guī)格: 0.2ml

 


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