商品介紹：
測(cè)定意義: 硝酸還原酶（NiR）是一類能催化亞硝酸鹽還原的酶，廣泛存在于微生物及植物體內(nèi)，是自然界氮循環(huán)過程中的關(guān)鍵酶，可以將亞硝酸鹽降解為NO或NH3，從而減少環(huán)境中亞硝態(tài)氮的積累，降低因亞硝酸鹽累積而造成的對(duì)生物體的毒害作用。 測(cè)定原理 亞硝酸還原酶可將NO2—還原為NO，使樣品中參與重氮化反應(yīng)生成紫紅色化合物的NO2—減少，即540nm處吸光值的變化可反應(yīng)亞硝酸還原酶的活性。 需自備的儀器和用品 天平、研缽、可見分光光度計(jì)、水浴鍋、低溫離心機(jī)、1mL玻璃比色皿。 |
提取液：液體 100 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 5 mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體 15 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑四：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè),7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
亞硝酸還原酶(NiR)測(cè)試盒可見分光光度法 | 50管/24樣 | 可見分光光度法 | BK-01S6481 |
實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招：
1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3、以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性，P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑，P／N小于1．5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照，與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求：
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封，放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣，水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封，并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑，應(yīng)將其固體或晶體密封保存，不宜長(zhǎng)期存放其水溶液，亞硫酸，氫硫酸溶液要密封存放，鉀，鈉，白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存，其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng)，所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封，放于陰涼通風(fēng)處保存。
操作步驟：
1. 樣品的準(zhǔn)備：
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備：收集細(xì)胞，用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測(cè)樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備：動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測(cè)樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒（P1511）測(cè)定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定，可以冰浴保存；如果當(dāng)天不能完成測(cè)定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據(jù)待檢測(cè)樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當(dāng)天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制：將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測(cè)緩沖液的比例進(jìn)行稀釋，即為反應(yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存，可當(dāng)天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備：需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測(cè)中可以各取20微升，參考樣品進(jìn)行檢測(cè)。說明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用；本試劑盒對(duì)于SOD的檢測(cè)并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品，但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽(yáng)性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。
100mL 植酸 Phytic Acid 室溫陰涼保存
50T 人細(xì)小病毒B19PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
5 g Glucosamine （胰島素抵抗誘導(dǎo)劑） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
25mL Denhardt’s Solution,50X Denhardt’s Solution,50X 常溫保存
5次 超快核酸轉(zhuǎn)膜試劑盒B（尼龍膜） Rapid Nucleic Acid Blotting Kit 常溫
2 ug pIEXBac-c-EGFP-4 pIEXBac-c-EGFP-4 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
曲瓊脂基礎(chǔ)(AFPA) AFPA 250g
1瓶 K562細(xì)胞株 K562 低溫運(yùn)輸和保存
LB肉湯（Lennox） LB Broth 250g
250U 腺苷脫氨 Adenosine Deaminase 4℃保存
250mL Sodium Phosphate Buffer（鈉緩沖液）,0.5M,pH7.5 Sodium Phosphate Buffer,0.5M,pH7.5 常溫保存
亞硝酸還原酶(NiR)測(cè)試盒可見分光光度法MYH9 肌球蛋白重鏈9抗體 規(guī)格: 0.2mlSA2 粘結(jié)蛋白SA2抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-PKC delta (Thr505) 磷酸化蛋白激C亞性D型抗體 規(guī)格: 0.1mlCCL20/MIP3 alpha 巨噬細(xì)胞性蛋白MIP-3a抗體 規(guī)格: 0.1ml
APOE/Apo E2 載脂蛋白E抗體 規(guī)格: 0.1mlFOXN1 叉蛋白N1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-chicken IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗雞IgG 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-Monkey IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗猴IgM 規(guī)格: 0.1ml
ARHGAP20 Rho GTP激活蛋白20抗體 規(guī)格: 0.2mlARHI 抑基因ras同源家族1抗體 規(guī)格: 0.2ml
p53R2/RRM2B 核苷酸還原M2B抗體 規(guī)格: 0.1mlKLHL24 Kelch樣蛋白24抗體 規(guī)格: 0.2ml
SEPT14 細(xì)胞分化蛋白SEPT14抗體 規(guī)格: 0.2mlHOXA11 同源盒蛋白HOXA11抗體 規(guī)格: 0.1ml
UBC6e/UBE2J1 泛素結(jié)合E2J1抗體 規(guī)格: 0.2mlRNF12 環(huán)指蛋白12抗體 規(guī)格: 0.2ml
MEK5/MAP2K5 絲裂原活化蛋白激激5抗體 規(guī)格: 0.1mlSCNN1B/βENaC 上皮鈉通道β抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-IGF1R(Tyr1161) 磷酸化胰島素樣生因子1受體抗體 規(guī)格: 0.1mlGrpa 半糖凝集素相關(guān)蛋白A抗體 規(guī)格: 0.2ml
ELF1/E74 like factor 1 轉(zhuǎn)錄因子ELF1抗體 規(guī)格: 0.2mlMAP4K4 絲裂原活化蛋白激MAP4K4抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-rat IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 規(guī)格: 0.3ml
