本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè),7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
土壤硝態(tài)氮測(cè)試盒微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | BK-01S6501 |
商品介紹：
測(cè)定意義: 土壤中的銨態(tài)氮可被土壤膠體吸附，呈交換性銨狀態(tài)氮肥，也可溶解在土壤溶液中，能直接被植物吸收利用，屬于速效性氮素。 測(cè)定原理 土壤中的銨態(tài)氮在強(qiáng)堿性介質(zhì)中與次氯酸鹽和作用，生成水溶性染料靛酚藍(lán)，在625nm處有特征吸收峰，吸光值與銨態(tài)氮含量成正比。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、常溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、微量石英比色皿，振蕩儀。 |
試劑組成和配制:
提取液：液體 100 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 5 mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體 15 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑四：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招：
1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3、以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性，P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑，P／N小于1．5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照，與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求：
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封，放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣，水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封，并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑，應(yīng)將其固體或晶體密封保存，不宜長(zhǎng)期存放其水溶液，亞硫酸，氫硫酸溶液要密封存放，鉀，鈉，白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存，其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng)，所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封，放于陰涼通風(fēng)處保存。
操作步驟：
1. 樣品的準(zhǔn)備：
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備：收集細(xì)胞，用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測(cè)樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備：動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測(cè)樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒（P1511）測(cè)定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定，可以冰浴保存；如果當(dāng)天不能完成測(cè)定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據(jù)待檢測(cè)樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當(dāng)天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制：將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測(cè)緩沖液的比例進(jìn)行稀釋，即為反應(yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存，可當(dāng)天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備：需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測(cè)中可以各取20微升，參考樣品進(jìn)行檢測(cè)。說(shuō)明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用；本試劑盒對(duì)于SOD的檢測(cè)并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品，但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽(yáng)性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。
250mL TAE電泳液,50× TAE Buffer, 50× 常溫
2 ug pGAPZα C pGAPZα C 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
抑菌劑效力檢查培養(yǎng)基
1瓶 CNE-2Z細(xì)胞株 CNE-2Z 低溫運(yùn)輸和保存
醇麥康凱瓊脂（SMAC）平板（9cm） Sorbitol Maconkey Agar Base 10個(gè)/包
100mg DNase I干粉 DNase I Powder 4℃或-20℃保存
100mL PIPES Buffer，0.5M, pH6.0 PIPES Buffer，0.5M, pH6.0 常溫保存
10塊 LB平板培養(yǎng)基（LB-Tet平板） LB Petri Dish 低溫
2 ug pPIC 6B pPIC 6B 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
葡萄糖酸鹽-雙岐桿菌鑒定 20支
2 ug pBNID pBNID 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
土壤硝態(tài)氮測(cè)試盒微量法CYP3A4 細(xì)胞色素P450 3A4抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-horse IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的兔抗馬IgG 規(guī)格: 0.1ml
phospho-FOXO4 (Ser262) 磷酸化叉蛋白4抗體 規(guī)格: 0.1ml
PTPIP51/FAM82A2 蛋白酪磷酸相互作用蛋白51抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-P53(Ser9) 磷酸化瘤抑制基因P53抗體 規(guī)格: 0.1ml
BCL2L12 BCL2樣12含脯蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
DSPP/Dentin phosphophoryn 牙本質(zhì)磷蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
UBE2D3 泛素蛋白連接D3抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-CRMP2 (Thr514) 磷酸化二嘧啶樣2抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-ASK1(Ser1033) 磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體 規(guī)格: 0.1mlENO3 骨骼肌烯醇化抗體 規(guī)格: 0.2ml
GNAI3 抑制型G蛋白α3抗體 規(guī)格: 0.2mlMPZL2/EVA1 髓鞘蛋白P0樣蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-PRKD1(Ser738) 磷酸化蛋白激C mu型抗體 規(guī)格: 0.1mlCSMD3 CSMD3蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
