商品介紹：
測(cè)定意義: 在食品中，亞硝酸鹽可與肉品中的肌紅素結(jié)合而更安定，在食品加工業(yè)中作為保色劑，以維持肉制品的良好外觀，并防止肉毒梭狀芽孢桿菌的產(chǎn)生，提高食用肉制品的安全，但是人體長(zhǎng)期攝入亞硝酸鹽過(guò)量的食品，可誘發(fā)消化系統(tǒng)癌變。 測(cè)定原理： 在酸性條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸反應(yīng)生成重氮化合物，再與N-1-萘基乙二胺形成紫紅色偶氮化合物，在540nm處有特征吸收峰。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器： 天平、研缽或勻漿器、水浴鍋、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、蒸餾水。 |
提取液：液體 100 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 5 mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體 15 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑四：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè),7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
食品中亞硝酸鹽含量測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法 | 50管/48樣 | 可見(jiàn)分光光度法 | BK-01S6493 |
實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招：
1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3、以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性，P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑，P／N小于1．5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照，與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類(lèi)及要求：
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封，放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣，水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封，并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑，應(yīng)將其固體或晶體密封保存，不宜長(zhǎng)期存放其水溶液，亞硫酸，氫硫酸溶液要密封存放，鉀，鈉，白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存，其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng)，所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封，放于陰涼通風(fēng)處保存。
操作步驟：
1. 樣品的準(zhǔn)備：
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備：收集細(xì)胞，用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類(lèi)常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測(cè)樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備：動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類(lèi)常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測(cè)樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒（P1511）測(cè)定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定，可以冰浴保存；如果當(dāng)天不能完成測(cè)定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據(jù)待檢測(cè)樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當(dāng)天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制：將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測(cè)緩沖液的比例進(jìn)行稀釋?zhuān)礊榉磻?yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存，可當(dāng)天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備：需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測(cè)中可以各取20微升，參考樣品進(jìn)行檢測(cè)。說(shuō)明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用；本試劑盒對(duì)于SOD的檢測(cè)并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品，但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽(yáng)性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。
100次 DAF-FM DA（NO熒光探針） Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
500mL Blotto-Antifoam in PBS Blotto-Antifoam in PBS 常溫保存
5g 低熔點(diǎn)瓊脂糖 Low Melting Agarose 常溫
2 ug pGL4.19 pGL4.19 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
亞硫酸鉍瓊脂培養(yǎng)基 Bismuth Sulfite Agar Medium 250g
2 ug pFastBac HT B pFastBac HT B 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
雙料乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基管（含小倒管） Double Lactose Bile Ferment Broth 10ml*20支
1000U 核酸內(nèi)切 III （Nth） Endonuclease III（Nth） -20℃保存
250mL RIPA without SDS with EDTA RIPA without SDS with EDTA 常溫保存
1 管 DH5α大腸桿菌 DH5α E.coli Strain -80℃保存
2 ug pRevTet-On pRevTet-On 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
食品中亞硝酸鹽含量測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法MTBP/MDM2BP 雙微體2基因結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-EIF4G1(Ser1238) 磷酸化真核翻譯起始因子4G抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-mouse IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlPhospho-NMDAR2B (Ser1480) 磷酸化谷受體2B抗體 規(guī)格: 0.1ml
RENBP 素結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-Smad2(Ser465/467) 磷酸化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2抗體 規(guī)格: 0.1ml
HSD17B1/HSD17 羥類(lèi)固醇脫17β抗體 規(guī)格: 0.1mlMyf6 生肌調(diào)節(jié)因子6抗體 規(guī)格: 0.2ml
Nadrin 神經(jīng)細(xì)胞發(fā)育相關(guān)調(diào)控蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlDonkey Anti-rabbit IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的驢抗兔IgG 規(guī)格: 0.1ml
Phospho-HSL (Ser959+960) 磷酸化荷爾蒙敏脂肪抗體 規(guī)格: 0.1mlTRAIL 瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體抗體 規(guī)格: 0.1ml
p47-phox NADPH氧化活化蛋白p47抗體 規(guī)格: 0.2mlIL-23 白介素-23抗體 規(guī)格: 0.1ml
CSFV/Classical swine fever virus 豬瘟毒抗體 0.2mlKLF6/PAC1 轉(zhuǎn)染抑基因KLF6抗體 規(guī)格: 0.1ml
Phospho-Met(Tyr1234/1235) 磷酸化肝細(xì)胞生因子受體(原基因)抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-SEK1/MKK4 (Ser257/Thr261) 磷酸化絲裂原活化蛋白激激4抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-dog IgG/AP 堿性磷酸（AP）標(biāo)記的兔抗狗IgG 規(guī)格: 0.1mlET-3 內(nèi)皮素3抗體 規(guī)格: 0.2ml
SKA1 紡錘體和著絲粒相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlUACA 葡萄膜自身抗原Uaca抗體 規(guī)格: 0.2ml
MAP3K8/TPL2 絲裂原活化蛋白激激8抗體 規(guī)格: 0.2mlPRMT5 組蛋白甲基轉(zhuǎn)移5抗體 規(guī)格: 0.2ml
