本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數(shù)據(jù)!
產品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
檸檬酸（CA）含量測試盒微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | BK-01S6573 |
商品介紹：
測定意義: CA又稱枸櫞酸，廣泛存在于各種生物胞質中，是生物體內重要的有機酸。CA也存在于線粒體基質中，是三羧酸循環(huán)步反應的產物，與脂肪、蛋白質和糖最終轉化為二氧化碳密切相關。 測定原理 酸性條件下，檸檬酸可將Cr6+還原成Cr3+，在545nm處有特征吸收峰；通過測定545nm吸光值的增加，即可計算出樣品中檸檬酸含量。 實驗中所需儀器及設備 可見分光光度計、低溫離心機、掌上離心機、可調式移液槍、1ml玻璃比色皿、雙蒸水 |
試劑組成和配制:
提取液：液體 100 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 5 mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體 15 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑四：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
實驗結果判斷我有妙招：
1、定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結果的閾值。
3、以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性，P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑，P／N小于1．5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法：加入底物經酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照，與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求：
① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封，放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣，水發(fā)生反應的物質要密封，并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑，應將其固體或晶體密封保存，不宜長期存放其水溶液，亞硫酸，氫硫酸溶液要密封存放，鉀，鈉，白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存，其相應的溶液較固體更易反應，所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封，放于陰涼通風處保存。
操作步驟：
1. 樣品的準備：
a. 細胞樣品的準備：收集細胞，用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備：動物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒（P1511）測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預計的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定，可以冰浴保存；如果當天不能完成測定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制：將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋，即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標準品準備：需自備SOD標準品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升，參考樣品進行檢測。說明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用；本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品，但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
10g D- 氨基葡萄糖鹽酸鹽 D-Glucosamine Hydrochloride 室溫干燥保存
50T O139CR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
100 mL D/F12培養(yǎng)基（含10%胎牛血清） Cell Culture Medium -20℃保存
2 ug pBiFC-VN173 pBiFC-VN173 低溫運輸，-20℃保存
10mL TE緩沖液，PH7.5
2 ug pX459 pX459 低溫運輸，-20℃保存
營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基（中國藥典） 250g
1瓶 C-33 A [C33A]細胞株 C-33 A [C33A] 低溫運輸和保存
茜素-β-半乳糖苷瓊脂(Aliz-gal瓊脂) Aliz-gal Agar 100g
100U Klenow 片段
5mL Phosphatase Inhibitors Cocktail-I Phosphatase Inhibitors Cocktail-I 常溫保存
檸檬酸（CA）含量測試盒微量法C1orf125 1號染色體開放閱讀框125抗體 規(guī)格: 0.2ml
SDCCAG10 結腸抗原10抗體 規(guī)格: 0.2ml
Gibberellins ?；撬?β-氨基乙磺酸抗體 0.1ml
GNG2 G蛋白γ2抗體/核苷酸結合蛋白γ2抗體 規(guī)格: 0.2mlCKLFSF2/CMTM2 趨化素樣因子超家族成員2抗體 規(guī)格: 0.2ml
SCYL1BP1 SCYL結合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1mlGoat Anti-rabbit IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的羊抗兔IgG 規(guī)格: 0.1ml
MAGEL2 黑色素瘤抗原樣基因2抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-c-Raf(Ser494) 磷酸化原基因c-Raf抗體 規(guī)格: 0.1ml
Histone H3 組蛋白H3抗體 規(guī)格: 0.1mlAPOB48R 載脂蛋白B受體抗體 規(guī)格: 0.2ml
TPP1/CLN2 細胞生抑制基因1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-CD151/MER2(Ser30) 磷酸化CD151抗體 規(guī)格: 0.1ml
Phospho-PDGFRA(Tyr572) 磷酸化小板源性生因子受體α 規(guī)格: 0.1mlNHEDC2 線粒體鈉/交換蛋白質2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Integrin alpha 3/CD49c 整合素α3抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-PNK1 (Ser114/Thr118) 磷酸化多聚合苷酸激3磷酸化抗體 規(guī)格: 0.1ml
IKK alpha + IKK beta KB抑制蛋白激α/β抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-Mink IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗水貂IgG 規(guī)格: 0.1ml
Mouse Anti-human IgG(3D3)/Gold 膠體金標記的鼠抗人IgG單克隆抗體 規(guī)格: 0.5mlMyosin heavy chain 1 肌球蛋白重鏈抗體 規(guī)格: 0.2ml
