商品介紹:
測定意義: 鎂是多種酶的激活劑,如磷酸酶、肌酸激酶、己糖激酶和羧化酶等。鎂也是組成DNA、RNA及核糖體大分子結(jié)構(gòu)所必需的元素。鎂是維持正常神經(jīng)和肌肉功能的重要元素。血清鎂濃度偏離正常值,與某些腎臟和內(nèi)分泌疾病等相關(guān)。 測定原理: 鎂離子在堿性介質(zhì)中氫氧化成膠體粒子,進(jìn)一步與達(dá)旦黃結(jié)合后呈橘紅色,在一定范圍內(nèi),540nm吸光度與鎂離子濃度成正比。 自備儀器和用品: 可調(diào)式移液槍、可見光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水。 |
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測,7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
血鎂濃度測試盒微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | BK-01S6793 |
實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。
操作步驟:
1. 樣品的準(zhǔn)備:
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
1 g HDAC抑制劑 Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
100mL DIPSO Buffer,0.2M,pH7.0 DIPSO Buffer,0.2M,pH7.0 常溫保存
10mL 超級雜交液(Oligo探針) SuperHyb Solution for Oligo -20℃保存
250mL Anticoagulant CPDA-1 Solution(抗凝劑CPDA-1) Anticoagulant CPDA-1 Solution 常溫保存
酸性L-G基礎(chǔ) Acid L-G Medium Base 250g
1瓶 KP-N-NS 細(xì)胞株 KP-N-NS 低溫運(yùn)輸和保存
大腸桿菌O157檢驗(yàn)
15KU 微球菌核酸 Nuclease ,Micrococcal 4℃保存
250mL Sodium Phosphate Buffer(鈉緩沖液),0.5M,pH9.0 Sodium Phosphate Buffer,0.5M,pH9.0 常溫保存
1 管 WB600枯草桿菌 WB600 Bacillus subtilis Strain -80℃保存
2 ug pBADZ-His6Cre pBADZ-His6Cre 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
血鎂濃度測試盒微量法BOK/Bcl 2 like protein 9 Bcl2樣凋亡蛋白9抗體 規(guī)格: 0.2ml
CXCL11 干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子抗體 規(guī)格: 0.2ml
PAR6 缺陷性分配同源物α抗體 規(guī)格: 0.2ml
GPR109A/Puma gamma G蛋白偶聯(lián)受體109A抗體 規(guī)格: 0.2ml
FAK/PTK2 粘著斑激抗體 規(guī)格: 0.1ml
Nanos3 骨巢蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
FAM104B FAM104B蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
FEM1A 前列素E受體4相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
RECQL5 RecQ解旋樣蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-horse IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗馬IgG 規(guī)格: 0.3mlAlpha-ENaC 鈉通道蛋白α ENaC 0.2ml
Netrin G2 軸突生誘向因子G2抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-YES1(Tyr537) 磷酸化原基因酪蛋白激Yes1抗體 規(guī)格: 0.1ml
FBXW8/FBXO29 FBXW8蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-NF1(Ser2515) 磷酸化1型神經(jīng)纖維瘤抗體 規(guī)格: 0.1ml