本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測,7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號(hào) |
土壤脲酶(SUE)測試盒可見分光光度法 | 50管/24樣 | 可見分光光度法 | BK-01S6819 |
商品介紹:
測定意義: 鈉是某些植物生長所必需的營養(yǎng)元素,植物缺鈉后出現(xiàn)黃化病。鹽生植物中往往以Na+調(diào)節(jié)滲透勢,降低細(xì)胞水勢,促進(jìn)細(xì)胞吸水。對(duì)土壤中的鈉元素的研究,為進(jìn)一步研究森林的養(yǎng)分循環(huán)、森林的經(jīng)營措施提供基礎(chǔ),從而更好的保護(hù)植物和生態(tài)環(huán)境。 測定原理 混合酸高溫消解土壤樣品,采用火焰光度計(jì)測定樣品中的鈉含量。 |
試劑組成和配制:
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。
操作步驟:
1. 樣品的準(zhǔn)備:
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對(duì)于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。
250mL MES Buffer,0.2M,pH6.0 MES Buffer,0.2M,pH6.0 常溫保存
100次 動(dòng)物種屬鑒PCR Mix 1(線粒體CO1基因) Animal DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
100mL Glycylglycine Buffer,0.5M,pH8.5 Glycylglycine Buffer,0.5M,pH8.5 常溫保存
AK瓊脂(2號(hào)) AK Agar(No.2) 250g
1瓶 QG-56細(xì)胞株 QG-56 低溫運(yùn)輸和保存
PS瓊脂 PS Agar 250g
1g 膠原蛋白Ⅰ型 Collagen TypeⅠ 4℃保存
50T 登革熱病毒Ⅱ型PCR檢測試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
50次 微量蛋白沉淀試劑盒 Mini Protein Precipitation Kit 常溫保存
2 ug pX334 pX334 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
4次 大提柱式真菌DNAout Maxi Column Fungal DNAOUT 常溫(RNase A需要放-20℃保存)
土壤脲酶(SUE)測試盒可見分光光度法ATF2 活化復(fù)制因子2抗體 規(guī)格: 0.1ml
Mouse Anti-human IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml
S100-A9/MRP14/CFAG/Calgranulin B S100A9抗體 規(guī)格: 0.1ml
LRCH1 富含亮重復(fù)家庭蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/APC APC標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2 規(guī)格: 0.1ml
CK10/Cytokeratin 10 細(xì)胞角蛋白10抗體 規(guī)格: 0.1ml
CD47/MER6 整合素相關(guān)蛋白CD47 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-mouse IgG/PE PE標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml
VPS18 空泡分選蛋白18抗體 規(guī)格: 0.1ml
SLN/Sarcolipin 肌脂蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
AKR1A1 乙醇脫1抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-IKK beta(Ser466) 磷酸化KB抑制蛋白激β抗體 規(guī)格: 0.1ml