本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè),7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
單胺氧化酶(MAO)測(cè)試盒微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | BK-01S6931 |
商品介紹：
測(cè)定意義: MAO(EC1.4.3.4) 主要存在于脊椎動(dòng)物的各種器官，特別是分泌腺、腦、肝臟，在無(wú)脊椎動(dòng)物、豆類(lèi)的芽等植物中也存在催化單胺類(lèi)物質(zhì)代謝，含量較低，具有重要的生理功能，其活性能反映肝纖維化的程度。此外，MAO活性異常導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)運(yùn)轉(zhuǎn)出現(xiàn)紊亂，從而引發(fā)多種病癥。 測(cè)定原理： MAO催化單胺類(lèi)底物脫氨生成相應(yīng)的醛，進(jìn)一步氧化成酸；底物在360nm處有特征吸收峰，測(cè)定360nm光吸收下降的速率，計(jì)算MAO活性。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器： 天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。 |
試劑組成和配制:
提取液：液體 100 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 5 mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體 15 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑四：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招：
1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3、以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性，P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑，P／N小于1．5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照，與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類(lèi)及要求：
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封，放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣，水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封，并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑，應(yīng)將其固體或晶體密封保存，不宜長(zhǎng)期存放其水溶液，亞硫酸，氫硫酸溶液要密封存放，鉀，鈉，白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存，其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng)，所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封，放于陰涼通風(fēng)處保存。
操作步驟：
1. 樣品的準(zhǔn)備：
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備：收集細(xì)胞，用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類(lèi)常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測(cè)樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備：動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類(lèi)常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測(cè)樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒（P1511）測(cè)定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定，可以冰浴保存；如果當(dāng)天不能完成測(cè)定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據(jù)待檢測(cè)樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當(dāng)天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制：將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測(cè)緩沖液的比例進(jìn)行稀釋?zhuān)礊榉磻?yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存，可當(dāng)天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備：需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測(cè)中可以各取20微升，參考樣品進(jìn)行檢測(cè)。說(shuō)明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用；本試劑盒對(duì)于SOD的檢測(cè)并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品，但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽(yáng)性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。
2 ug pCMV-HA-C pCMV-HA-C 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
CCDA添加劑 CCDA Supplement 2ml*5支
250g 蛋白胨 Peptone 室溫保存
50T 人黏附分子CD44基因PCRPCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
100μL Ac-DEVD-CHO（Caspase 3抑制劑） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
250mL Citrate Buffer（檸檬酸鹽緩沖液）,0.5M,pH5.0 Citrate Buffer,0.5M,pH5.0 常溫保存
10次 DNA 5’末端標(biāo)記試劑盒 DNA 5’ End-Labeling Kit -20℃保存
2 ug pHT304 pHT304 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
龍膽紫血液瓊脂基礎(chǔ) Crystal violet blood agar base 250g
1瓶 JAR細(xì)胞株 JAR 低溫運(yùn)輸和保存
無(wú)菌取樣袋（帶鐵絲）（30cm*18cm） 50個(gè)/包*4
單胺氧化酶(MAO)測(cè)試盒微量法Streptavidin/SA protein 鏈親和素抗體 0.1mlHSP58/Cornulin 熱休克蛋白58抗體 規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-rat IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlMDFIC 肌原調(diào)節(jié)抑制蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
SMS2/Sphingomyelin Synthase 2 鞘磷脂合成2抗體 規(guī)格: 0.2mlMCHR/GPR24 G蛋白偶聯(lián)受體24抗體 規(guī)格: 0.1ml
Anthrax 抗體（采用活疫苗制備） 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-pig IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗豬IgG 規(guī)格: 0.1ml
GH/Growth Hormone 生激素抗體 規(guī)格: 0.1mlGRAMD2 GRAM結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-CDKN1A/P21 (Thr145) 磷酸化p21蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlEphrin A5 酪蛋白激A5受體抗體 規(guī)格: 0.1ml
UBE2D4 泛素蛋白連接D4抗體 規(guī)格: 0.2mlAKIRIN1 AKIRIN1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
IFNA11/Limitin/Interferon alpha 11 干擾素α11抗體 規(guī)格: 0.2mlGPVI/Glycoprotein VI 糖蛋白VI/六糖蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
CCDC114 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白114抗體 規(guī)格: 0.2mlADAMTS12 整合素樣金屬蛋白與凝1型-12抗體 0.2ml
CD133 antigen 造干細(xì)胞抗原CD133抗體 規(guī)格: 0.1mlDDX43/CT13 瘤/睪抗原13抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlNOC3L/FAD24 脂肪細(xì)胞分化因子24 規(guī)格: 0.2ml
phospho-RGS19(Tyr143) 磷酸化G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體 規(guī)格: 0.1mlFAM164B FAM164B蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
