LCMS-IT-TOF旨在通過使用高速/高精確度MSn(n≥10)數(shù)據(jù)在研發(fā)領(lǐng)域,如雜質(zhì)分析、代謝輪廓和生物標(biāo)記物研究,大力協(xié)助鑒定目標(biāo)化合物的新技術(shù)。
上述數(shù)據(jù)表明四個化合物在2.0分鐘內(nèi)的分析。MSn 的自動功能,使得它有可能獲得通過外部標(biāo)準(zhǔn)的高精確度的MSn 數(shù)據(jù),利用高速質(zhì)譜測量性能。
高速正負(fù)極性切換,在不能判斷樣品是否將作為正離子或負(fù)離子檢測時,它特別有用。 LCMS-IT-TOF采用了新開發(fā)的、高度精確和穩(wěn)定的電源供應(yīng)器,以及新開發(fā)的高壓開關(guān),允許只有1秒或更少的極性切換(需要尖銳的色譜峰與改進(jìn)的高速色譜法)。極性切換的速率為2.5赫茲,它允許獲得每秒2.5倍的正離子和負(fù)離子的質(zhì)譜對。
示例數(shù)據(jù)
LCMS-IT-TOF的離子光學(xué)系統(tǒng),帶來一種新型的離子導(dǎo)入的方法,被稱為壓縮離子導(dǎo)入或CII,Skimmer、八極桿和個鏡頭的組合,把連續(xù)的離子流轉(zhuǎn)換為脈沖,以便引進(jìn)到離子阱中。這種方法使得它可以在引入離子阱之前控制離子的積累,使得RF在所有CII積累的離子進(jìn)入離子阱的瞬間應(yīng)用于射頻環(huán)電極。LCMS-IT-TOF采用這種不同于傳統(tǒng)離子阱的控制。CII的發(fā)展有效地將LC系統(tǒng)連接至MS,并且極大地改善了離子阱捕獲率,克服了以前的缺陷,從而提高了靈敏度。
圖1和圖2顯示*A肟(ERY-AO)的UV和MS色譜,這是一個由應(yīng)變產(chǎn)生的細(xì)菌,稱為Saccaropolyspora*的大環(huán)內(nèi)酯類抗生素。一些雜質(zhì)被標(biāo)示出來。圖3顯示了*A肟(ERY-AO)的質(zhì)譜圖。*AO的分子顯示為m/z =747.4661。獲得數(shù)據(jù)字和理論值之間的質(zhì)量差(747.4643)約為0.002。
如圖4所示的MS/MS譜圖的m/z=747。大峰的m/z=571,被視為A區(qū)*AO結(jié)構(gòu)的損失,因為質(zhì)量差與M/Z=747是176。在m/z=396.2416被視為C區(qū)。這是高度可靠的數(shù)字,因為與理論的數(shù)字相比,其質(zhì)量差僅為0.003。
圖6顯示了雜質(zhì)A的質(zhì)譜圖:MS/MS譜圖表明ERY-AO具有類似的結(jié)構(gòu)。
與C區(qū)(396.2386)理論圖相比,m/Z=396.2406的質(zhì)量差為0.002。M/Z=571也進(jìn)行了檢測,它是類似于ERY-AO的MS/MS譜圖。然而,雜質(zhì)的分子量是733,雜質(zhì)A和從該損失之間的雜質(zhì)的質(zhì)量差是162。而從地區(qū)ERY-AO質(zhì)量差是14.0144。使用精確質(zhì)量計算器,這個數(shù)字被認(rèn)為是CH2(14.0156),并假設(shè)雜質(zhì)有一個結(jié)構(gòu),從一個區(qū)的甲基A組,以一個氫取代。
樣品一旦進(jìn)入LC / MS便不能重復(fù)采集分析;因此,至關(guān)重要的是,儀器可以自動選擇合適的母離子。利用LCMS-IT-TOF,各種離子選擇標(biāo)準(zhǔn)都可使用,如根據(jù)離子的強度或m/z ,以及智能自動母離子選擇,如單同位素峰選擇和帶電狀態(tài)的過濾。
按強度順序選擇母離子
中性丟失分析原則
如果的中性丟失在MS2的譜圖中觀察到,則MS3分析自動進(jìn)行。中性丟失分析中,只有目標(biāo)離子在MS3中進(jìn)行測量,從而有效的獲得所需信息,而不浪費時間。
由于有關(guān)目標(biāo)離子的詳細(xì)信息,可以通過使用中性丟失分析功能得到,它可以成為一個支持化合物鑒定的強大工具(例如,藥物研發(fā)中的二相代謝產(chǎn)物)。
中立丟失分析功能示例中性丟失分析和MS3的測量相結(jié)合,提供了準(zhǔn)確的質(zhì)量信息,可進(jìn)行高度可靠的磷脂結(jié)構(gòu)分析
設(shè)置PS(極性基團(tuán) X:*) - 特定NL (87Da) ,并進(jìn)行中性丟失分析