人膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5)ELISA試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中人(ANXA5)的含量。
有效期:6個月
保存條件:2-8℃
[實驗原理]
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被人(ANXA5)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人(ANXA5)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
[說明]
1.zui終的實驗結(jié)果與試劑的有效性、實驗者的相關(guān)操作以及當時的實驗環(huán)境密切相關(guān),請務(wù)必準備充足的標本備份。
2.不同批次的同一產(chǎn)品可能會有少許差別,如:檢測限、靈敏度以及顯色時間等,請依據(jù)試劑盒內(nèi)說明書進行實驗操作,網(wǎng)站電子版說明書僅作參考。
3.只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果,不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴格遵守本試劑盒的實驗說明才會得到*的檢測結(jié)果。
4.本公司只對試劑盒本身負責,不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責,請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預(yù)留充足的樣本。
5.使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA實驗結(jié)果偏差。
6.若樣本為細胞培養(yǎng)上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細胞狀態(tài)、細胞數(shù)量、采樣時間等,所以可能存在檢測不出的情況。
7.某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因為與本產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測出。
在實際操作中,除了挑選優(yōu)良試劑外,有必要嚴厲依照操作過程進行操作,一起作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以謹慎的工作作風(fēng)檢查每一份標本,才干確保檢查質(zhì)量。ELISA試劑盒如今國內(nèi)已有適當數(shù)量的單位具有全自動酶標儀,這關(guān)于完成ELISA規(guī)范化檢查、進步檢查質(zhì)量起到了重要作用。
人膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5)ELISA試劑盒實驗中遇到的問題解答
一、洗板
也許因素:
1) 選用手藝洗板,孔與孔之間液體穿插。 2) 選用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,致使洗板不*;洗板針阻塞,抽吸不*;洗板不暢,致使洗板作用差。 3) 反響板過多形成洗板等待時刻長。
解決辦法:
1) 確保洗液注滿各孔,洗板針疏通,洗完板后在吸水紙(挑選潔凈、無或少塵的吸水資料)上輕輕拍干; 2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
二、顯色
ELISA試劑盒也許因素:
1) 顯色劑制造后放置時刻過長或運用過期顯色劑; 2) 加顯色劑時濺起孔外形成液體回流。
解決辦法: 1) 顯色劑盡量在臨用前制造,堅持不bi過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不必; 2) 加樣時堅持顯色劑不外流; 3) A、B液應(yīng)防止觸摸金屬器械。
三、停止
也許因素如加停止液時發(fā)生較多氣泡,致使假陽性添加。所以在加停止液時應(yīng)防止發(fā)生氣泡。
四、讀板
ELISA試劑盒如讀板時板底不清洗等。應(yīng)確保酶標板清洗。所以在全部操作過程中確保酶標板不觸摸次氯酸; 盡也許完成ELISA檢查規(guī)范自動化,有用進步檢查質(zhì)量。
[注意事項]
1.嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2.洗板不正確可以導(dǎo)致不準確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3.消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4.底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍的底物液不能使用。
5.避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。
6.在儲存和溫育時避免強光直接照射。
7.平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8.任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。
9.不能使用過期產(chǎn)品。
10.如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。