抗體的鑒定:
1)抗體的效價(jià)鑒定:鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力??贵w的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗(yàn)測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。
3)真核翻譯起始因子2C2抗體的親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。
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英文名稱 Anti-Phospho-ZAP70 (Tyr493)
中文名稱 磷酸化zeta相關(guān)蛋白70抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗 磷酸化抗體
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 激酶和磷酸酶 細(xì)胞膜受體 t-淋巴細(xì)胞
蛋白分子量 predicted molecular weight: 68kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human Zap-70 around the phosphorylation site of Tyr493
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
別 名 Zap-70(Phospho-Tyr493); ZAP70 (phospho Y493); p-ZAP70 (Y292); p-Zap-70(Tyr292); p-Zap-70(Y292); ZAP-70; ZAP 70; ZAP70; zeta-associated protein 70; ZAP-70=protein tyrosine kinase Syk homolog {SH2-like and C-terminal kinase domains}; Tyrosine-protein kinase ZAP-70; 70 kDa zeta-associated protein; Syk-related tyrosine kinase. SRK; STD; TZK; ZAP70_HUMAN; Tyrosine-protein kinase ZAP-70; 70 kDa zeta-chain associated protein.
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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.和
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
2-氯-5-羥甲吡分子式:143.57英文名稱:2- Cl -5-:21543-49-7分子量: C6H6ClNO
4-羥-6-甲嘧分子式:110.11英文名稱:4- hydroxy -6- methyl group:3524-87-6分子量: C5H6N2O
2,3,6-*喹喔啉分子式:172.23英文名稱:2,3,6- trimethyl quinoxaline:17635-21-1分子量: C11H12N2
6-甲氧-2-乙酰萘分子式:200.23英文名稱:6- a -2- acetyl naphthalene:3900-45-6分子量: C13H12O2
心律平英文名稱:Propafenone分子式:377.9分子量: C21H28ClNO3:34183-22-7
茵陳提取物英文名稱:Wormwood extract分子式:分子量::
人參皂甙Rh2英文名稱:Ginsenoside Rh2分子式:622.87268分子量:C36H62O8:78214-33-2
醋龍環(huán)氧英文名稱:Prednisolone acetate epoxy分子式:400.46482分子量: C23H28O6:38680-83-0
尿嘧分子式:112.09英文名稱:Uracil:66-22-8分子量: C4H4N2O2
醚甲環(huán)唑分子式:406.26英文名稱:醚甲環(huán)唑:119446-68-3分子量: C19H17Cl2N3O3
4--1,2,3-三氮唑分子式:145.16英文名稱:41,2,3 -三氮唑:1680-44-0分子量: C8H7N3
磷酸化zeta相關(guān)蛋白70抗體小鼠肝細(xì)胞英文名稱:H22
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
鋅指同源框蛋白4(ZFHX4)重組蛋白英文名稱:Recombinant Zinc Finger Homeobox Protein 4 (ZFHX4)
小鼠肺細(xì)胞英文名稱:LLC
肽酶抑制因子16(PI16)重組蛋白英文名稱:Recombinant Peptidase Inhibitor 16 (PI16)
倉鼠卵巢細(xì)胞英文名稱:Lec1
SW-13(人腎上腺質(zhì)細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
大鼠胰島素細(xì)胞英文名稱:INS-1
粘質(zhì)沙雷氏菌 Serratia marcescens產(chǎn)色鏈霉菌 Streptomyces diastatochromogenes
哥倫比亞MUG培養(yǎng)基/哥倫比亞4-甲基傘形酮葡糖苷酸培養(yǎng)基/Columbia-MUG Medium大腸桿菌的熒光檢測250克國產(chǎn)/進(jìn)口
人食管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
實(shí)驗(yàn)原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)激活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補(bǔ)體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。