急性經(jīng)口毒性實驗
概念和試驗目的
(一) 急性毒性概念
急性毒性是指機體(人或?qū)嶒瀯游?一次(或24小時內(nèi)多次)接觸外來化合物之后所引起的中毒效應，甚至引起死亡。
但須指出化合物使實驗動物發(fā)生中毒效應的快慢和劇烈的程度，可因所接觸的化合物的質(zhì)與量不同而異。有的化合物在實驗動物接觸致死劑量的幾分鐘之內(nèi)，就可發(fā)生中毒癥狀，甚至死亡。而有的化合物則在幾天后才顯現(xiàn)中毒癥狀和死亡，即遲發(fā)死亡。此外，實驗動物接觸化合物的方式或途徑不同，“一次”的含義也有所不同。凡經(jīng)口接觸和各種方式的注射接觸，“一次”是指在瞬間將受試化合物輸入實驗動物的體內(nèi)。而經(jīng)呼吸道吸入與經(jīng)皮膚接觸，“一次”是指在一個特定的期間內(nèi)實驗動物持續(xù)地接觸受試化合物的過程，所以“一次”含有時間因素。
(二) 實驗目的
1.求出受試化合物對一種或幾種實驗動物的致死劑量(通常以LD50為主要參數(shù))，以初步估計該化合物對人類毒害的危險性。
2.闡明受試化合物急性毒性的劑量－反應關(guān)系與中毒特征。
3.利用急性毒性試驗方法研究化合物在機體內(nèi)的生物轉(zhuǎn)運和生物轉(zhuǎn)化過程及其動力學變化。也可用于研究急救治療措施。
二、實驗動物和染毒方法
(一) 實驗動物選擇
在衛(wèi)生毒理學領(lǐng)域中，體內(nèi)試驗以實驗動物為研究對象，最終是為了闡明受試外來化合物對人的急性危害性質(zhì)和危害強度。所以選擇實驗動物時，要求在其接觸化合物之后的毒性反應，應當與人接觸該化合物的毒性反應基本一致，雖然利用任何一種或幾種實驗動物的急性毒性結(jié)果向人外推都必須十分慎重，但這一選擇實驗動物的原則仍非常重要。
1.物種選擇以選擇哺乳動物為主。實際應用中以大鼠和小鼠為主，尤以大鼠使用很多。需指出大鼠并非對外來化合物都最敏丅感。家兔常用于研究化合物的皮膚毒性，包括對粘膜的刺激。貓、狗也用于急性毒性試驗，但因價貴不易于大量使用。豬為雜食動物，對一些化合物的生物效應表現(xiàn)與人有相似之處，尤其是皮膚結(jié)構(gòu)與人較近似。但因體大、價貴，不便大量使用。
歸納起來，在進行化合物急性毒性研究中，選擇實驗動物的原則是：盡量選擇對化合物毒性反應與人近似的動物；易于飼養(yǎng)管理，試驗操作方便；易于獲得、品系純化，且價格較低的動物。為了有利于預測化合物對人的危害，要求選擇兩種以上的實驗動物，最好一種為嚙齒類，一種為非嚙齒類，分別求出其急性毒性參數(shù)。
一般研究外來化合物急性毒性，需雌雄兩性動物同時分別進行，每個劑量組兩性動物數(shù)相等。急性毒性使用小鼠體重以18~25g、大鼠180~240g、豚鼠200~250g、家兔2~2.5kg、貓1.5~2.0kg左右為宜。
(二) 實驗動物喂養(yǎng)環(huán)境
實驗動物喂養(yǎng)室室溫應控制在22±3℃，家兔可控制在20±3℃，相對濕度30%～73%，無對流風。每籠動物數(shù)以不干擾動物個體活動及不影響試驗觀察為度，必要時需單籠飼養(yǎng)。飼養(yǎng)室采用人工晝夜為好，早6點至晚6點進行12小時光照，其余12小時黑暗，一般食用常規(guī)試驗室飼料，自由飲水。
(三) 實驗動物染毒方法
1.經(jīng)口(胃腸道)接觸目的是研究外來化合物能否經(jīng)胃腸道吸收及求出經(jīng)口接觸的致死劑量(LD50)等。由于外來化合物可以污染飲水及食物，因此，此種染毒方式在衛(wèi)生毒理學中占有重要地位。
(1) 灌胃是將液態(tài)受試化合物或固態(tài)、氣態(tài)化合物溶于某種溶劑中，配制成一定濃度，裝入注射器等定量容器，經(jīng)過導管注入胃內(nèi)。
在每一試驗系列中，同物種實驗動物灌胃體積最好一致，即以單位體重計算所給予的毫升數(shù)應一致，即ml/kg或ml/g計。這是因為成年實驗動物的胃容量與體重之間有一定的比例。按單位體重計算灌胃液的體積，受試化合物的吸收速度相對較為穩(wěn)定。小鼠一次灌胃體積在0.2~1.0ml/只或0.1~0.5ml/10g體重較合適，大鼠一次灌胃體積不超過5ml/只(通常用0.5~1.0ml/100g體重)，家兔不超過10ml/2kg體重，狗不超過50ml/10kg體重。
急性經(jīng)口毒性實驗
