MTT Cell Proliferation Assay Kit
MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒
搜索關(guān)鍵詞：
MTT 噻唑蘭；臺盼藍(lán)染色法；CCK-8 細(xì)胞增殖和毒性檢測試劑盒；WST-8；CAS：298-93-1；
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒 | MX3005-500T | 500T | 279 |
MX3005-1000T | 1000T | 499 |
基本描述：
噻唑蘭（Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide, 簡稱MTT，CAS：298-93-1），也稱作溴化噻唑藍(lán)四氮唑，是一種黃色染料，已經(jīng)廣泛替代傳統(tǒng)的臺盼藍(lán)染色法或者放射性同位素插入法，用來檢測細(xì)胞活力、細(xì)胞增殖以及毒性分析。MTT是一種可接受氫離子的化合物染料，帶正電荷，具有細(xì)胞膜滲透性?；罴?xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能夠?qū)⑼庠催M(jìn)入的MTT還原成為水不溶性的藍(lán)紫色MTT-甲臜結(jié)晶，而死細(xì)胞不具此功能。甲臜結(jié)晶不能穿透細(xì)胞膜，因此沉積在處于增殖且未受損傷的細(xì)胞內(nèi)。在特定溶劑的作用下*溶解甲臜結(jié)晶，然后通過酶標(biāo)儀測定570 nm附近的吸光度。細(xì)胞增殖越多，則吸光度越高；細(xì)胞毒性越大，則吸光度越低。
本MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒（MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit）采用*的甲臜溶解液，能夠非常好的*甲臜結(jié)晶，使檢測本底低、靈敏度高，且線性范圍寬。
產(chǎn)品組分
組分編號 | 組分名稱 | 保存方法 | 貨號（規(guī)格） | |
MX3005-500T | MX3005-1000T | |||
MX3005-A | MTT Solution MTT溶液（5mg/ml） | -20℃避光 | 5ml | 2×5ml |
MX3005-B | Formazan Solvent 甲臜溶解液 | -20℃或室溫 | 60ml | 2×60ml |
注意事項(xiàng)
使用96孔板進(jìn)行檢測，如果細(xì)胞培養(yǎng)時間較長，一定要注意蒸發(fā)的問題。①由于96孔板周圍一圈容易蒸發(fā)，可以采取棄用周圍一圈的辦法，改加PBS、無菌水或培養(yǎng)液；②可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方以緩解蒸發(fā)。
MTT溶液在低溫下會凝固，請置于室溫或20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后再使用。
MTT溶液需盡量減少反復(fù)凍融的次數(shù)，若單次用量很少，建議根據(jù)需求分裝后置于-20℃保存。MTT溶液顏色如變?yōu)榛揖G色，請勿使用。
4） 甲臜溶解液當(dāng)置于-20℃保存需解凍使用，或室溫保存產(chǎn)生沉淀，可置于37℃水浴孵育以促進(jìn)溶解，并且必須全部溶解后混勻使用。
5） 加入甲臜溶解液后請輕輕混勻，但需注意避免產(chǎn)生泡沫。亦可借助顯微鏡觀察甲臜是否*溶解。
6） 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用方法（以96孔板為例）
收集對數(shù)生長期的細(xì)胞，用含血清的培養(yǎng)液配制成單細(xì)胞懸液，調(diào)整細(xì)胞密度，以每孔3000-10,000個細(xì)胞接種到96孔板，每孔體積100µl，培養(yǎng)板的邊緣孔用無菌PBS填充。設(shè)置空白孔和對照孔。
【注①】：通常情況，細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加3000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加6000個細(xì)胞。具體每孔所用細(xì)胞數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞大小、增殖速度的快慢等來決定。
【注②】：需設(shè)置空白孔（不含細(xì)胞，含培養(yǎng)液、MTT和甲臜溶解液），對照孔（含細(xì)胞、相同濃度的藥物溶解介質(zhì)、培養(yǎng)液、MTT和甲臜溶解液），每組設(shè)置3個復(fù)孔。
37℃，5% CO2繼續(xù)培養(yǎng)或根據(jù)實(shí)驗(yàn)具體需求進(jìn)行培養(yǎng)，一般培養(yǎng)6-24h。
根據(jù)實(shí)驗(yàn)具體需求，給予0-20µl干預(yù)藥物處理，37℃，5% CO2繼續(xù)培養(yǎng)至合適時間。
小心吸掉培養(yǎng)液，每孔加入100µl新鮮培養(yǎng)液，再加入10µl MTT溶液（5 mg/ml），加樣時盡量勤換槍頭，控制加量誤差。繼續(xù)培養(yǎng)4h。
小心吸掉培養(yǎng)液，每孔加入110µl 甲臜溶解液，置搖床上低速振蕩10min，使得結(jié)晶物充分溶解。可在光學(xué)顯微鏡下觀察結(jié)晶物是否*溶解。如果紫色結(jié)晶較小或較少，溶解的時間會短些；如果紫色結(jié)晶較大或較多，溶解的時間會長些。
在酶標(biāo)儀上搖勻后，選擇570nm，測定吸光度。記錄結(jié)果，比色以空白調(diào)零。
【注①】：對于細(xì)胞毒性檢測，以未經(jīng)藥物處理細(xì)胞的OD值為hao的，然后計(jì)算藥物處理細(xì)胞所占的比率（x），公式如下：OD（未經(jīng)藥物處理細(xì)胞）/OD（藥物處理細(xì)胞）hao的。然后建立直方圖。
相關(guān)產(chǎn)品
編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
MX3001-5G | Trypan Blue 臺盼藍(lán) | 5g |
MX3002-50ML | 0.4% Trypan Blue Solution 0.4%臺盼藍(lán)染色液 | 50ml |
MX3003-100T | 臺盼藍(lán)染色細(xì)胞存活率檢測試劑盒 | 100T |
MX3004-250MG | MTT 噻唑蘭 | 250mg |
MX3005-500T | MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒 | 500T |
MX3006-5ML | Alamar Blue 阿爾瑪藍(lán)細(xì)胞增殖及毒性檢測試劑 | 5ml (500T) |
MX3007-100T | WST-1細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒 | 100T |
MX3008-1ML | Cell Counting Kit (CCK-8) CCK-8細(xì)胞增殖及毒性檢測試劑 | 1ml (100T) |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品與實(shí)驗(yàn)服務(wù)工作，主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信”的經(jīng)營理念。堅(jiān)持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。
細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒
細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒
