DAPI染色液免疫檢測(cè)產(chǎn)品說(shuō)明:
DAPI即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole),是一種能夠與DNA強(qiáng)力結(jié)合的熒光染料,常用與熒光顯微鏡觀測(cè)。因?yàn)镈API 可以透過(guò)完整的細(xì)胞膜,它可以用于活細(xì)胞和固定細(xì)胞的染色。分子式為C16H15N5·2HCl ,分子量為350.25 ,CAS Nμmber 28718-90-3。
DAPI可以穿透細(xì)胞膜與細(xì)胞核中的雙鏈 DNA 結(jié)合而發(fā)揮標(biāo)記的作用,可以產(chǎn)生比DAPI自身強(qiáng)20多倍的熒光,和 EB 相比,對(duì)雙鏈 DNA的染色靈敏度要高很多倍。顯微鏡下可以看到顯藍(lán)色熒光的細(xì)胞,熒光顯微鏡觀察細(xì)胞標(biāo)記的效率高(幾乎為100 %),且對(duì)活細(xì)胞無(wú)毒副作用。DAPI 染色常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè),染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。DAPI也常用于普通的細(xì)胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈 DNA 染色。細(xì)胞經(jīng)熱激處理后用 DAPI染色 3分鐘,在熒光顯微鏡下可以看到到細(xì)胞核的形態(tài)變化。
DAPI的大激發(fā)波長(zhǎng)為340nm,大發(fā)射波長(zhǎng)為488nm,DAPI和雙鏈 DNA結(jié)合后,大激發(fā)波長(zhǎng)為360nm,大發(fā)射波長(zhǎng)為460nm。
本DAPI染色液可以直接用于固定細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色。
使用方法:
1.對(duì)于固定后的細(xì)胞或組織樣品,適當(dāng)洗滌去除固定劑。如果需要進(jìn)行免疫熒光染色,可進(jìn)行免疫熒光染色,染完畢后再進(jìn)行 DAPI 染色。如果不需要進(jìn)行其它染色,則直接進(jìn)行DAPI染色。
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞或組織切片,加入少量 DAPI 染色液,覆蓋住樣品即可。對(duì)于懸浮細(xì)胞,至少加入待染色樣品體積3倍的染色液,混勻。
3.室溫孵育5-10分鐘。
4.吸除 DAPI 染色液,用 TBST、PBS或生理鹽水洗滌 2-3次,每次 3-5分鐘,洗掉未結(jié)合的DAPI。
5.用帶有 360nm 激發(fā)波長(zhǎng),460nm 發(fā)射波長(zhǎng)的濾光片的熒光顯微鏡觀察細(xì)胞。
注意事項(xiàng):
1.熒光染料都存在淬滅的問(wèn)題,建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | DAPI染色液免疫檢測(cè) | 貨號(hào) | CS-C6039 |
英文名稱(chēng) | 規(guī)格 | 50ml |
保存條件:-20℃避光保存,一年有效
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
細(xì)胞生物學(xué)研究的常用技術(shù)有哪些:
1.顯微技術(shù):包括顯微觀察,顯微操作.
2細(xì)胞組分分析技術(shù):離心分離技術(shù),生物大分子定位技術(shù),定量細(xì)胞化學(xué)分析技術(shù).
3.細(xì)胞工程:細(xì)胞培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
1. 本試劑盒的檢測(cè)試劑中含有螢光素酶,反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致其逐漸失活。盡管經(jīng)測(cè)試本試劑反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響,為取得良好的使用效果,*次解凍后可適當(dāng)分裝保存。反復(fù)凍融過(guò)程中,可能會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)試劑中出現(xiàn)少量沉淀,此時(shí)宜平衡至室溫,并盡量溶解。如仍有殘留的不溶物,可以離心去除后使用,經(jīng)測(cè)試不會(huì)影響后續(xù)的檢測(cè)效果。
2. 檢測(cè)時(shí)需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板,相鄰孔之間會(huì)產(chǎn)生相互干擾。
3. 使用說(shuō)明中提供了檢測(cè)ATP標(biāo)準(zhǔn)品的方法,實(shí)際檢測(cè)細(xì)胞活力時(shí)通常并不需要檢測(cè)ATP標(biāo)準(zhǔn)品。
公司正在出售的產(chǎn)品:
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