牛補(bǔ)體片斷5a(C5a)ELISA試劑盒的特異性的說(shuō)明:
特異性一:
特異性一般指試劑盒出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性的概率。特異性不高、穩(wěn)定性差和重復(fù)性差、樣本前處理方法不理想均會(huì)導(dǎo)致試劑盒假陽(yáng)性或假陰性的出現(xiàn)。作為篩選方法,假陰性比假陽(yáng)性對(duì)用戶產(chǎn)生的經(jīng)濟(jì)影響大,因此廠家往往允許有一定的假陽(yáng)性,對(duì)假陰性控制較嚴(yán)。選取一批陰性樣本,通過(guò)添加已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)回收率,可初步判定試劑盒的特異性高低,回收率過(guò)低,容易出現(xiàn)假陰性,回收率超過(guò)100%,容易出現(xiàn)假陽(yáng)性。也可通過(guò)測(cè)定已知陰陽(yáng)性樣本,通過(guò)判定陰陽(yáng)性符合率來(lái)測(cè)定試劑盒的特異性。
特異性二:
特異性的另一層含義是指對(duì)同類物質(zhì)的交叉反應(yīng)率。某些抗體除對(duì)某一專一物質(zhì)起反應(yīng)外,還對(duì)同類結(jié)構(gòu)類似的物質(zhì)有反應(yīng)。對(duì)同類物質(zhì)均有反應(yīng)的抗體可開發(fā)出多殘留或總殘留試劑盒,如磺胺類和氟喹諾酮類多殘留試劑盒,對(duì)于只要求檢測(cè)總殘留的項(xiàng)目來(lái)說(shuō),可大大節(jié)省成本和操作時(shí)間。無(wú)論專一試劑盒還是多殘留試劑盒均要求對(duì)無(wú)關(guān)物質(zhì)無(wú)交叉反應(yīng)、交叉反應(yīng)極低、或在目標(biāo)樣本中沒(méi)有無(wú)關(guān)交叉反應(yīng)物質(zhì),以降低試劑盒的假陽(yáng)性。
牛補(bǔ)體片斷5a(C5a)ELISA試劑盒的詳細(xì)說(shuō)明:
1.試劑盒保存:較長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí)的控制溫度為:-20℃;頻繁使用時(shí)的控制溫度為:2-8℃。
2.濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
3.中、英文說(shuō)明書可能會(huì)有不*之處,請(qǐng)以英文說(shuō)明書為準(zhǔn)。
4.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì),此為正常現(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。需要而未提供的試劑和器材有:①標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀;②高速離心機(jī);③電熱恒溫培養(yǎng)箱;④干凈的試管和Eppendof管。
5.系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測(cè)樣品較多時(shí),用多通道移液器。
6.蒸餾水,容量瓶等,例:
Ⅰ.酶聯(lián)板(Assay plate):一塊(96孔);
Ⅱ.標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶;
Ⅲ.樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶;
Ⅳ.生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶;
Ⅴ.辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶;
Ⅵ.生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100);
Ⅶ.辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100);
Ⅷ.底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶;
Ⅸ.濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍;
Ⅹ.終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。